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DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 11:36:04瀏覽次數:156次

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貨號 FS-X10333
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)正在熱銷的產品:Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光標記化內分泌腺衍生血管內皮生長因子抗體IgG血管緊張I 97%
HSP-90 Alpha/HRP 辣根過氧化物標記熱休克蛋白90α抗體IgGD-氨酰-D-氨 99%
HSP-90 Beta /HRP 辣根過氧化物標記熱休克蛋白90β抗體IgGH-精氨-甘氨

產品介紹:

英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

SCR7是一種DNA連接酶IV(DNA Ligase IV)抑制劑,抑制非同源末端連接(NHEJ)。SCR7增強CRISPR/Cas9條件的編輯頻率。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1533426-72-0

純度:99.78%

分子量:334.39

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)

英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10333

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

諾爾斯氏鏈霉菌磷化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體Human NDRG4 前列腺D2(PGD2)

乳乳球菌乳亞種蛋白激MST抗體Human NDUFA5 前列腺A1(PGA1)

棘托竹蓀磷化蛋白激MST抗體Human NDUFA7 前列環(PGI2)

假蒼白桿菌磷化肌球蛋白輕鏈2抗體Human NDUFA8 前列環(PGI)

臭曲霉髓鞘轉錄因子1抗體Human NDUFA9 前顆粒蛋白(PGRN)

*枯草芽胞桿菌髓樣白血病-1抗體Human NDUFAF1 前膠原C內肽增強子1(PCOLCE1)

球色單隔孢屬微管相關蛋白2抗體Human NDUFAF2 前膠原C端肽(PCP)

產短桿菌肌增強因子2B抗體Human NDUFAF4 前病整合位點1(Pim1)

孟氏假單胞菌心血管發育中胚層相關蛋白1抗體Human NDUFB11 前白蛋白(PA)

球形副球菌轉移相關蛋白2抗體Human NDUFB1 普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)

空腸彎曲桿菌MYC結合蛋白2抗體Human NDUFB10 葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)

弗氏鏈霉菌精/脯富含卷曲蛋白1抗體Human NDFIP1 葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)

釀酒酵母微管相關蛋白9抗體Human NDUFB2 葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)

產亞硝鹽馬杜拉放線菌有絲分裂驅動蛋白樣1抗體Human NDUFA4L2 葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)

雜色曲霉髓過氧化物抗中性粒胞質IgG抗體Human HCRT(Orexin) 葡萄糖氧化(GOD)

波蘭青霉兔抗小鼠IgA抗體Human NCOA5 葡萄糖激調節蛋白(GKRP)

堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質量規格:>98%,BR番瀉B

噬冷菌(加詞待譯)Algoriphagus│zhangzhouensis 質量規格:>98%,BR番瀉A

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格:>99%,BR和厚樸
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)芹側耳 2,4-二乙催產

大腸埃希氏○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○128 2-基-N-甲基乙酰催乳

植物乳桿 十氫異喹啉大內皮

白僵 三氟甲磺鐵(III)單氧化

擬木荷生德克斯酵母 6-溴-1-四氫萘酮單氧化B

小小鏈霉(微小鏈霉) 5-硝基香草單核趨化蛋白1

短芽孢桿 4-氨基喹哪啶膽固

孢吸水鏈霉北京變種 L-天門冬二芐酯鹽鹽膽固7α羥化

竹黃* 叔丁基苯基碳酯膽固酯

異常威克漢姆酵母 5--2-甲膽固酯轉移蛋白

金灰青霉 (R)-3,3-二甲基-2-丁膽紅

大腸埃希氏 4-甲基芐脒鹽鹽乙酰轉移

魚蛉假絲酵母 2-乙氧基苯甲酯

解淀粉堿單胞 2--4-頻哪酯膽

立枯絲核 二甲基烯1,6-己二酯彈性蛋白

 


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