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脂肪微血管內皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 13:52:12瀏覽次數:138次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-01X9866
脂肪微血管內皮細胞公司正在出售的產品:肺大靜脈平滑肌細胞規格:5 × 105次方(1ml)
肺動脈成纖維細胞規格:5 × 105次方(1ml)
肺泡上皮細胞規格:5 ×105次方(1ml)

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

產品屬于:

產品名稱:脂肪微血管內皮細胞    

產品規格:5×105

貨號:FS-01X9866

產品類型:原代細胞

單位:T25/瓶

提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告

保存培養溫度(℃):37

運輸溫度(℃):常溫

 

   

98.jpg 

細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

豬內皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit規格:96T/48T

豬血管生成2(ANG-2)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit規格:96T/48T

豬血管生成受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪激2(Tie-2)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA Kit規格:96T/48T

豬血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit規格:96T/48T

豬乙酰受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit規格:96T/48T

豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit規格:96T/48T

豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit規格:96T/48T

豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit規格:96T/48T

豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit規格:96T/48T

C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine C-reactive protein,CRP ELISA Kit規格:96T/48T

豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit規格:96T/48T

豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒英文名稱:swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit規格:96T/48T

豬可溶性P選擇(sP-Selectin)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine soluble P-selectin,sP-Selectin ELISA Kit規格:96T/48T

豬白介17(IL-17)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine interleukin 17,IL-17 ELISA Kit規格:96T/48T

豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine myelin basic protein,MBP ELISA Kit規格:96T/48T

豬生長釋放多(GHRP)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit規格:96T/48T

α干擾(IFN-α)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit規格:96T/48T

豬磷化細胞外信號調節激(pERK)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit規格:96T/48T
脂肪微血管內皮細胞ALOXE3  表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關蛋白)規格: 0.2ml

ALPK3  α蛋白激3抗體(心肌)規格: 0.2ml

CEND1  細胞周期通道和神經細胞分化蛋白1抗體規格: 0.2ml

DHRS9  短鏈脫氫/還原家族9抗體規格: 0.2ml

DLL3  Notch信號通路Delta樣配體3抗體規格: 0.2ml

EME1  減數分裂內切EME1抗體規格: 0.2ml

FAM3C/ILEI  上皮分泌型FAM3C蛋白抗體規格: 0.2ml

FSTL5  卵泡抑相關蛋白5抗體規格: 0.2ml
實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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