當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TAACT人α1抗胰糜蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | AACT人α1抗胰糜蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Alpha1 Antichymotrypsin, AACT Elisa Kit |
貨號 | FS-H63409 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Polyporus│leptocephalus (Jacq.) Fr. 黃多孔菌Polyporus│leptocephalus (Jacq.) Fr.分離基物:子實體斜面培養物安全等級:1模式菌株:no150生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Penicillium│restrictum J.C. Gilman & E.V. Abbott 局限青霉Penicillium│restrictum J.C. Gilman & E.V. Abbott分離基物:土壤斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl. 可可球二孢Lasiodiplodia theobromae (Pat.) Griffon & Maubl.分離基物:變色木材斜面培養物安全等級:1模式菌株:no綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧。生長特性在PDA平板培養基:上(30℃、RH70%)菌落初為灰白色,后變為灰褐至褐黑色,培養基:為黑色,日生長量為4.0cm;在全光條件下,15~20d產生黑色近球狀子實體,子座表面附滿菌絲。一個子座內有多個分生孢子器,近球形,180.0~318.9×157~436.0μm;孔口周緣深褐色,未成熟分生孢子單、無色,為成熟孢子壁比成熟的分生孢子壁更厚,平均1.4μm;成熟的分生孢子雙褐色至黑色,表面有黑白相間的縱條紋,平均22.1×12.9μm;存儲條件:定期移植法 純度:98%
Sarocladium sp. 帚枝霉屬(斜面)Sarocladium sp.凍干安全等級:1模式菌株:未知綜合PDA+乳糖( 1升普通PDA加5g乳糖):馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:22℃,好氧 純度:98%
Fusarium│sp. 鐮孢霉Fusarium│sp.斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%
Phomopsis sp. 擬莖點霉(斜面)Phomopsis sp.分離基物:根莖斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Pleurotus│djamor (Rumph. ex Fr.) Boedijn 淡紅側耳Pleurotus│djamor (Rumph. ex Fr.) Boedijn分離基物:子實體斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:液氮超低溫凍結法;定期移植法 純度:97%
Alrnaria│alrnata (Fr.) Keissl. 交鏈孢霉Alrnaria│alrnata (Fr.) Keissl.分離基物:枝干斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
AACT人α1抗胰糜蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理CD147/TCSF 外基質金屬蛋白酶誘導因子抗體豆腐果苷3,5-二苯硫酚Human PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit
CD160/By55 NK受體BY55抗體拉西坦2,3-二苯硫酚Human TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit
CD161/NK1.1 CD161抗體夫拉扎勃(原:呋咱甲氫龍)2,3-二苯硫酚Human PINP (Procollagen I N-terminal Propeptide ) ELISA Kit
CD163/M130 CD163抗體泊苷2,3-二苯硫酚Human KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit
CD166/ALCAM/MEMD 活化白粘附分子抗體間苯二酚3--5-(基)苯酚Human ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit
CD158a/KIR2DL1 NK抑制性受體2DL1抗體維生素B13--5-(基)苯酚Human AGGF1 (Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1) ELISA Kit
CD158e NK抑制性受體3DL1抗體維生素BT反式二-(m)-雙[2-(二鄰甲苯基膦)芐基]乙二鈀(II)Human C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit
CD158b2 NK抑制性受體2DL3抗體乙水楊胺反式二-(m)-雙[2-(二鄰甲苯基膦)芐基]乙二鈀(II)Human C5a (Complement Component 5a) ELISA Kit
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