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貨號 | FS-X10253 |
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培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:長春新堿(Vinblastine)
英文名稱:Vinblastine
產品規格:100μl|500μl
貨號:FS-X10253
產品介紹:
英文名稱:Vinblastine 產品規格:100μl|500μl 濃度:1mg/mL in DMSO 分子量:811 純度:>98%(HPLC) 儲存:-20℃,有效期12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
食品檢測用鼠傷門氏菌熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體Human CFP(Properdin) 驢卵泡激(FSH)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Heme結合蛋白2抗體Human SECISBP2 驢黃體生成(LH)免疫試劑盒
大麗輪枝孢肝粘附分子2抗體Human SEC63 驢雌二(E2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌基己糖D抗體Human RRBP1(Ribosome-binding protein 1) 鹿
雞白痢沙門氏菌HHLA2蛋白抗體Human Secretin receptor 鹿胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒
放射桿狀根瘤菌羥脯抗體Human SECTM1(Secreted and transmembrane protein 1) 鹿胰島樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒
壺黑蛋巢布諾德變型熱休克蛋白10抗體Human PGS1(CDP-diacylglycerol–glycerol-3-phosphate 3-phosphatidyltransferase, mitochondrial) 鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
香菇同源盒蛋白PRH抗體Human Securin/PTTG1 鹿尿氧化免疫試劑盒
谷棒桿菌羥類固脫氫17β抗體Human SELK 鹿內皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
釀酒酵母皰疹病相關泛特異性蛋白7抗體Human SEMA3C 鹿免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
黃曲霉同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體Human SDHC 鹿氧化(XOD)免疫試劑盒
棲土曲霉異染色質蛋白1-α(HP1α)抗體Human SDHB 鹿環磷腺(cAMP)免疫試劑盒
Lactococcus組蛋白H4抗體Human AKAP17A(A-kinase anchor protein 17A) 鹿環磷鳥(cGMP)免疫試劑盒
棒曲霉乙酰化組蛋白H4抗體Human SDR39U1 鹿紅膜蛋白(EMP)免疫試劑盒
香茅假單胞菌基化組蛋白H3抗體Human SDPR 鹿次氧化免疫試劑盒
放射形根瘤菌二甲基化組蛋白H3抗體Human SDR42E1 鹿γ干擾(IFNG)免疫試劑盒
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:分析標準品,96%佛手柑內酯
曲霉Aspergillus│sp. 質量規格:分析標準品白花前胡
皺紋假單胞菌Pseudomonas│corrugata 質量規格:分析標準品花椒
長春新堿(Vinblastine)亞銹褐褶 6-溴-2,3-二氮雜萘酮活躍腦源性神經營養因子
大腸埃希 5-甲氧基-2-甲基-3-乙甲酯α1微球蛋白
球孢白僵 1-Boc-母親DPP同源物4
Taibaiella 2,2-二甲基-1-視網膜母瘤蛋白1
達班湖喜鹽芽孢桿 1-甲基-3-甲脫腳病病
紅球 2--4-基嘧啶單核趨化蛋白2
根霉 2,3,5-三溴吡啶白三烯E4
葉點霉屬 2-溴-3--5-(三氟甲基)吡啶Wnt-16蛋白
塔賓曲霉 5-溴-3--7-氮雜神經酪激受體1
矮小青霉 3-氟-5-吡啶神經酪激受體2
發酵畢赤酵母 8--5-氨基喹啉腫瘤壞死因子受體超家族成員1B
香菇 3-氨基異煙膠原吡啶交聯
枯草芽孢桿 十二烷基二苯二磺鈉TAU-1蛋白
芽胞桿 來氟洛TAU-5蛋白
皺紋假單胞 (2-甲氧基-5-)乙白血病病抗體
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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