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RAR激動劑(AGN194310)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:07:34瀏覽次數:233次

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貨號 FS-X10855
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TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase

中文名稱:RAR激動劑(AGN194310)

英文名稱:AGN 194310

產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg

貨號:FS-X10855

產品介紹:

AGN194310(VTP-194310)是RAR激動劑,對RARα/β/γ的Kd分別為3/2/5nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:229961-45-9

別名:VTP-194310

純度:98.26%

分子量:424.55

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

金耳人基質金屬蛋白抑制因子2Anti-PPP3CB Antibody人Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)

變異短波單胞菌小鼠組蛋白H2bAnti-PPP4R2 Antibody人Bκ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)

橄欖色盤多毛孢大鼠激M2型同工Anti-PPP4R1L Antibody人ADAM金屬肽含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)

糞鏈球菌人抑瘤MAnti-PPP2R3C Antibody人ADAM金屬肽含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)

羊肚菌小鼠血管內皮粘附分子1Anti-PRDM1 Antibody人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因

黑曲霉小鼠糖皮質類固受體Anti-PRAF2 Antibody人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因

中國臺灣根霉人肺表面活性物質相關蛋白DAnti-PRDM1 Antibody人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)

長雙歧桿菌長亞種大鼠γ基丁Anti-PPRC1 Antibody人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)

細孢毛霉小鼠黃體生成釋放激Anti-PRDM12 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)

大腸桿菌大鼠5羥色Anti-PRIM1 Antibody人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)

真姬菇人肺表面活性物質相關蛋白CAnti-PRIM1 Antibody人絲蛋白抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)

紫色鏈霉菌人肺表面活性物質相關蛋白BAnti-PRKACA Antibody人絲蛋白抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)

費希爾曲霉大鼠P物質受體Anti-PRIM1 Antibody人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因

產氣莢膜梭菌 A型小鼠腦紅蛋白Anti-PRKACB Antibody人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因

蕓薹生鏈格孢人表面活性蛋白AAnti-PRKAG2 Antibody人類似RIKEN cDNA 31050K21 基因

皺褶青霉小鼠8異前列腺Anti-PRKACG Antibody人類似RIKEN cDNA 31050K21 基因

扭轉原腸胚形成同源蛋白1抗體黑根須腹菌人組織細胞淋巴瘤細胞

蛋白酪磷樣N前體蛋白抗體正紅菇貓淋巴瘤細胞

TUB蛋白抗體馨生棒孢LC-2/ad 人肺腺癌細胞

味覺受體蛋白家族2亞基16抗體麥斑點附球霉KPL-4 人乳腺癌細胞
RAR激動劑(AGN194310)鹽古桿 厭氧瓊脂乙酰CoA羧化

側耳 梭鑒別瓊脂(DCA)異檸檬脫氫

耐寒短桿 強化梭鑒別瓊脂(DRCA)硬脂酰去飽和1

紫色紅曲 強化梭瓊脂游離血紅蛋白

短乳桿 3-氨基吡-2-甲甲酯游離脂肪

乳酒假絲酵母 強化梭培養基(RCM)

鹽沼鹽桿 TSN瓊脂孕酮

同合小克銀漢霉 2-甲氧基吡啶粘蛋白2

運動節桿 2-乙基磺酰脂蛋白磷脂A2

豇豆慢生根瘤 2-吡啶乙鹽鹽脂蛋白脂

花楸盤多毛孢 11-溴-1-十一脂多糖;內

靈芝(紅芝,赤芝) 4-肉桂脂肪

隆氏針層孔 二甲橙二鈉鹽脂肪合成

釀酒酵母 亞硫鐵瓊脂中性粒彈性蛋白

腸沙門氏腸亞種邁阿密血清型 TBB培養基腫瘤壞死因子α

 


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