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貨號 | FS-X10805 |
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中文名稱:RNR抑制劑(COH29)
英文名稱:COH29
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10805
產品介紹:
COH29是一種高效的RNR抑制劑,具有抗癌活性,在KB細胞中的IC50值為8μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1190932-38-7 純度:98.04% 分子量:420.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
櫟小皮傘大鼠肉堿脂酰轉移Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調結合蛋白(CALD)
大腸埃希氏桿菌兔子補體片斷3aAnti-NECTIN1 Antibody人鈣調結合蛋白(CALD)
枯草芽孢桿菌小鼠溶菌Anti-NEDD1 Antibody人鈣調磷(CaN)
鍋孢霉人CD14分子Anti-NECTIN3 Antibody人鈣調磷(CaN)
栗酒裂殖酵母人凋亡誘導因子Anti-NECTIN3 Antibody人骨退化特異標志物(CTX-2)
耐輻射奇球菌兔子基質金屬蛋白3Anti-NEFH Antibody人骨退化特異標志物(CTX-2)
白僵菌大鼠磷化乙酰羧化Anti-NEFH Antibody人鈣結合蛋白(CR)
釀酒酵母小鼠可溶性CD30Anti-NEFL Antibody人鈣結合蛋白(CR)
臭曲霉兔磷TRAP-5b Anti-NEDD4 Antibody 人骨形成蛋白6(BMP-6)
冠突曲霉人白共同抗原Anti-NEFL Antibody人骨形成蛋白6(BMP-6)
冷桿菌兔子可溶性CD40配體Anti-NEFM Antibody人脂肪結合蛋白(FABP)
聚生殼菌小鼠可溶性肌球蛋白重鏈Anti-NEIL3 Antibody人脂肪結合蛋白(FABP)
海洋桿菌大鼠金屬硫蛋白Anti-NEGR1 Antibody人腺三磷結合盒轉運體A1(ABCA1)
膜醭畢赤酵母大鼠心肌特異性肌鈣蛋白TAnti-NEIL3 Antibody人腺三磷結合盒轉運體A1(ABCA1)
化妝品 霉、小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1Anti-NEFM Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)
釀酒酵母兔主要組織相容性復合體Ⅰ類Anti-NEK2 Antibody人羥脯糖蛋白(HRGP)
胰島β細胞生長因子抗體邊莢魚藤根瘤菌人涎腺腺樣囊性癌細胞
環指蛋白149抗體假地豆根瘤菌人T淋巴細胞白血病細胞
心臟蛋白磷1結合蛋白/環指蛋白158抗體波葉山螞蟥根瘤菌人胎盤絨毛癌細胞
環指蛋白180抗體本氏木蘭根瘤菌人急性淋巴母細胞白血病細胞
RNR抑制劑(COH29)香菇* 固體培養基低氧誘導因子-1β
成晶節桿 改良GAM瓊脂抑劑水通道蛋白1
多脂鱗傘 高鹽度腦心浸液肉湯水通道蛋白2
枯草芽孢桿 膽汁七葉瓊脂水通道蛋白3
蘇云金芽孢桿太平洋亞種 腦心浸液肉湯腎損傷分子1
柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇) 酵母蛋白胨培養基氧化三
巴貝斯蟲(青海貴南株) 胰蛋白胨大豆瓊脂血管生成1
耐冷冷桿 類桿-膽汁-七葉(BBE)瓊脂血管生成2
大毛霉 鋰鹽改良MRS培養基血小板反應蛋白;凝血敏感蛋白1
大腸埃希 甘露瓊脂培養基CD31分子
尖角凸臍蠕孢 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰基質金屬蛋白2
金黃桿屬 KF鏈球肉湯白介12
蘋果黑腐皮殼 RODAC培養皿(TSA)活化蛋白C
新疆鹽地桿 鋰鹽自然殺傷
麻疹孿生球 四硫磺鹽煌綠增液(TTB肉湯)主要急性期蛋白
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