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PI4KIIIβ抑制劑(PIK-93)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:52:02瀏覽次數:179次

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貨號 FS-X10926
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產品介紹:

PIK-93是一種合成的,有效的PI4KIIIβ抑制劑,IC50值為19nM,同時可抑制PI3Kγ和PI3Kα的活性,IC50值分別為16nM和39nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:593960-11-3

純度:99.13%

分子量:389.88

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:PI4KIIIβ抑制劑(PIK-93)

英文名稱:PIK-93

產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10926

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

隱花青鵝膏人二氧化Bacillus cereus小鼠溶菌(LZM)

枯草芽孢桿菌人環加氧2Bacillus cereus小鼠可溶性CD30(sCD30)

蠟狀芽孢桿菌人周期依賴性激5Bacillus cereus小鼠可溶性CD30(sCD30)

楊樹細盾霉人激肽釋放Bacillus cereus小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)

腫痂鏈霉菌人磷酯Cγ鏈Bacillus cereus小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)

德爾布有孢酵母人神經Bacillus cereus小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)

釀酒酵母人磷酯酰肌特異性磷酯CBacillus cereus小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)

谷棒桿菌Ⅳ型人磷酯CBacillus cereus小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)  

釀酒酵母人酪激2Bacillus cereus小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)  

白絨紅蛋巢菌人白介1β轉換Bacillus cereus小鼠血管緊張轉化(ACE)

枯草芽孢桿菌人整合連接激1Bacillus cereus小鼠血管緊張轉化(ACE)

乳桿菌屬人色P450c21B/21-羥化Bacillus cereus小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)

草木樨中華根瘤菌人末端脫氧核轉移Bacillus cereus小鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)

黃曲霉人2,3-雙加氧Bacillus cereus小鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)

人絲蛋白Bacillus cereus小鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)

擬莖點霉人脾臟酪激Bacillus cereus小鼠活化A(ACV-A)

端粒卡哈爾體蛋白抗體菠蘿泛生氏菌猞猁皮膚成纖維樣細胞

WBP2蛋白抗體#蘇云金芽孢桿菌急性髓系細胞白血病細胞

Wolfram綜合征蛋白1抗體姬松茸Abm-1人急性髓性白血病細胞

信號通路Wnt16抗體小白菇(疊生)人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
PI4KIIIβ抑制劑(PIK-93)膜醭畢赤酵母 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銫、銅、鐵、汞、、鋰、鎂、錳、鈉、鎳、鉛、銣、硒、鋅、釩/低氧誘導因子-1α

硬皮地星 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、、鋰、鎂、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、硒、鍶、鈦、、α干擾

蠟蚧 鋁、砷、鋇、鈹、鉍、鈣、鈰、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、汞、銦、、鋰、鎂、錳、鈉、鎳、鉛、釕、硒、鍶、S轉移

白色短波單胞 鋁、砷、、鋇、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、汞、銦、、鎂、錳、鉬、鈉、鎳、鉛、銻、鈧、硒、鍶、尿二磷葡萄糖轉移

楊盤二孢(都不提供) 鋁、砷、、鋇、鈹、鉍、鈣、鎘、鈷、鉻、銅、鐵、鎵、鍺、汞、、鋰、鎂、錳、鉬、鎳、磷、鉛、鉑、銣、磺基轉移

pBudCE4.1 甲酯紅霉-N-脫甲基

大腸埃希氏 砷、鉍、鎵、鍺、銦、鉛、銻、硒、錫,碲、/As, Bi, Ga, Ge, In, Pb, Sb,苯-4羥化

枯草芽孢桿 鋇、鈹、鈰、鈷、銦、鋰、鎂、鉛、銠、、釔/Ba, Be, Ce, Co, In, Li, Mg,氨基吡啉-N-脫甲基

蠟狀芽孢桿 鉍、鍺、銦、镥、銠、鈧、鋱、釔/Bi, Ge, In, Lu, Rh, Sc, Tb, Y白斑癥病雙抗體夾心

高盧蜜環(可訂購) 鈧、銫、銦、銠/Sc, Cs, In, Rh磷脂酰

靈芝 鉍、鍺、銦、銠、鈧、鋱、釔/Bi, Ge, In, Rh, Sc, Tb, Y磷脂酰絲

海芋平臍蠕孢 砷、鈹、鎘、鉻、鎳、鉛、硒、/As, Be, Cd, Cr, Ni, Pb, Se, Tl游離脂肪

大毛霉 鋰、鈉、、、鎂、鈣、鍶、鋇/Li, Na, K, NH4+, Mg, Ca, Sr, BaGTP

熱帶靈芝 氟、、溴、硝根、硫根/F-, Cl-, Br-, NO3-, SO42-P糖蛋白;滲透性糖蛋白

腫囊腐霉 鑭、鈰、鐠、釹、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、釔/La, Ce, Pr, Nd, Sm,維生C

 


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