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貨號	FS-X10672

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：BRAF抑制劑(PLX7904)

英文名稱：PLX7904

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10672

產品介紹:

PLX7904是有效的，選擇性的BRAF抑制劑，在表達突變體RAS的細胞中，對BRAFV600E的IC50值約為5nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：1393465-84-3

純度：98.15%

分子量：512.53

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

日本玉蕈球蛋白抗原Anti-AFF1 Antibody胞漿磷蛋白3(STMN3)

枯斑擬盤多毛孢蛋白激活受體-2桔抗肽Anti-AGAP2 Antibody胞漿磷蛋白2(STMN2)

側柄褐孔菌末梢同源匡基因多肽片段Anti-AGBL2 Antibody胞漿磷蛋白1(STMN1)

桃紅平菇海葵神經（35肽）Anti-AGBL4 Antibody胞漿抗蛋白水解3(CAP3)

枯草芽孢桿菌海葵神經（35肽）Anti-AGBL2 Antibody胞漿抗蛋白水解2(CAP2)

莫哈韋芽孢桿菌海葵神經（35肽）Anti-AGPAT3 Antibody胞漿多聚A結合蛋白1樣蛋白(PABPC1L)

釀酒酵母海葵神經（35肽）Anti-AGBL3 Antibody胞漿-5',3'-核(NT5C)

水叢毛單胞菌海葵神經（35肽）Anti-AGPAT5 Antibody胞脫(CDA)

茯苓海葵神經（35肽）Anti-AIF1 Antibody伴肌動蛋白(NEB)

白淺灰鏈霉菌重組乙肝病核心抗原Anti-AHSP Antibody伴刀豆球蛋白A(ConA)

殼菌重組乙肝病e抗原Anti-AIF1 Antibody半椎蛋白2(HMCN2)

乳乳球菌乳亞種重組人登革熱病2型診斷抗原Anti-AGR3 Antibody半椎蛋白1(HMCN1)

黑曲霉重組豬水腫蛋白Anti-AICDA Antibody半乳糖神經酰(GALC)

產克雷伯氏菌腎上腺髓質（22-52）Anti-AIFM2 Antibody半乳糖凝集9C(GAL9C)

尖鐮孢腎上腺髓質（22-42）Anti-AIG1 Antibody半乳糖凝集9B(GAL9B)

彎孢菌α-1抗(抗原）Anti-AIRE Antibody半乳糖凝集9(GAL9)

細胞中心粒蛋白抗體吸水鏈霉菌奧薩霉亞種大鼠膀胱組織提取物

PSF2蛋白抗體涇陽鏈霉菌大鼠腎小球組織提取物

腎上腺皮質發育異常同源蛋白抗體沙鏈霉菌大鼠冠狀動脈組織提取物

蛋白調解因子6抗體羅倫隱球酵母大鼠牙乳頭組織提取物
BRAF抑制劑(PLX7904)嗜碳芽孢桿雙烯雌α-

蝙蝠蛾擬青霉鄰三聯苯維生B2

細鏈格孢菲醌煙酰

葡萄座腔異丁基病性腹瀉抗體

傳染性喉氣管炎病 (R)-2-(甲氧甲基)吡咯烷副結核分支桿抗體

美味側耳 5,7-二-8-羥基喹啉口蹄疫O型抗體

馬賽 2,2-二(3-氨基-4-羥苯基)六氟烷口蹄疫I型抗體

漢遜德巴利酵母漢遜變種 1-氨基-5-萘蓋他病抗體

果生鏈核盤 6--2-硝苯四環類

球毛殼 2,6-二苯甲β-內酰

小馬勃 1-二氫茚酮谷轉氨

炭黑曲霉五氟苯磺酰淀粉

類干酪乳桿 4-苯氧基纖維

盤孢 N,N-二苯基甲酰乳糖

屎腸球乙對酯游離血紅蛋白
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)