產(chǎn)品介紹:

中文名稱(chēng)：ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)

英文名稱(chēng)：GSK429286A

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10725

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

馬葡萄球菌腦腸肽28Anti-DGKB Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)

瑟氏泰勒蟲(chóng)（盧氏株-2）咬合蛋白抗原Anti-DGKD Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)

枯草芽孢桿菌胚胎干關(guān)鍵蛋白抗原Anti-DGKE Antibody人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)

糞腸球菌鳥(niǎo)脫羧抗原Anti-DGKI Antibody人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)

大腸埃希菌小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原Anti-DGKH Antibody人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)

玫瑰庫(kù)克氏菌嗅球蛋白1多肽抗原Anti-DGKB Antibody人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)

杰丁畢赤酵母增食欲-A/欲激A抗原Anti-DGKZ Antibody人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)

季也蒙有孢漢遜酵母縮宮受體Anti-DHPS Antibody人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)

異常威克漢姆酵母食欲受體(多肽)Anti-DHPS Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種增殖潛能相關(guān)蛋白抗原Anti-DGKK Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)

費(fèi)雷生枝霉p19ARF抑癌基因抗原Anti-DHRS11 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)

乳酒假絲酵母磷化絲裂原活化蛋白激p38抗原Anti-DHRS4 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)

大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗原Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)

抗生鏈霉菌腫瘤抑制基因抗原（野生型P53）Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)

糞腸球菌突變型P53抗原Anti-DIABLO Antibody人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)

尖孢鐮刀菌野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原Anti-DIAPH2 Antibody人內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)

ATP受體抗體匍枝根霉人前列腺增生細(xì)胞

磷脂酰肌激催化亞單位A抗體聚多曲霉（薩氏曲霉）人胚腎細(xì)胞

蛋白體激活因子PA28γ抗體鏈格孢小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

前列腺E2受體2抗體根霉小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
ROCK1和ROCK2抑制劑(GSK429286A)摩氏摩根 2-氟苯酮V

葡萄座腔 4-氟-3-硝苯Ⅶ

華根霉 4-氟-2-硝苯Ⅷ

乙假絲酵母 4-氟-2-甲Ⅸ

水生拉恩氏 甲-4-硝基芐酯Ⅹ

根瘤 2-氨基-5-三氟甲苯流感病抗體

解蛋白弧 2-溴-4,6-二氟苯流感病H3N2亞型

Lonsdalea quercina subsp. quercina 2-氟-1,3-二甲苯新孢子蟲(chóng)病抗體

德曼鏈霉 3-氟-1,2-二甲苯血管舒緩激肽

康寧木霉 二糠基二硫α平滑肌肌動(dòng)蛋白

橄欖色青霉 紅白介31

巴氏醋桿 正丁基解脲支原體抗體

盤(pán)孢屬 1,3,5-苯酰總膽汁

香菇 α-安息香肟膽汁

泡盛曲霉 呋喃-3-甲鉤端螺旋體