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貨號 | FS-X10673 |
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中文名稱:TMEM16A chloride通道抑制劑(Shikonin)
英文名稱:Shikonin
產品規格:1mL(10mM)|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10673
產品介紹:
Shikonin是一個TMEM16A chloride通道的抑制劑,IC50值是6.5uM.。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:517-89-5 別名:C.I.75535;Isoarnebin 4 純度:99.64% 分子量:288.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
平臍蠕孢菌血管緊張1轉換抑制劑(抗原)Anti-AJUBA Antibody半乳糖凝集7B(GAL7B)
球形阜孢ACINUS 多肽抗原Anti-AK5 Antibody半乳糖凝集7(GAL7)
谷棒桿菌小鼠IgAAnti-AKAP11 Antibody半乳糖激2(GALK2)
匍枝根霉原變種(可訂購)促腎上腺皮質激(7-23)(抗原)Anti-AK6 Antibody半乳糖激1(GALK1)
枯草芽孢桿菌肌動蛋白(抗原)Anti-AKAP1 Antibody半乳糖β(GLβ)
枯草芽孢桿菌人血清白蛋白標記生物Anti-AKAP14 Antibody半乳糖α(GLα)
棕褐橙鏈霉菌粒-巨噬集落激因子3抗原Anti-AKAP17A Antibody半乳糖變旋(GALM)
銀色鏈霉菌肺表面活性蛋白B抗原Anti-AKAP13 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉移4(GAL3ST4)
韓國游動微菌陽離子轉運蛋白1Anti-AKAP5 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉移3(GAL3ST3)
克里布所島津氏菌基質金屬蛋白-9(抗原)Anti-AKIP1 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉移2(GAL3ST2)
黑曲霉晚期糖基化終末產物特異性受體(抗原)Anti-AKIP1 Antibody半乳糖-3-O-磺基轉移1(GAL3ST1)
地芽孢桿菌屬14-3-3 蛋白(多肽抗原)Anti-AKR1C8P Antibody半乳凝8(GAL8)
棉毛狀嗜熱霉植物14-3-3蛋白抗原Anti-AKR1C8P Antibody半乳凝4(GAL4)
栗色針孔菌FRA-1多肽蛋白Anti-AKR1E2 Antibody半乳凝2(GAL2)
毛柄金錢菌(金針菇)調亡誘導因子(多肽片斷抗原)Anti-AKT1 Antibody半乳凝14(GAL14)
抗輻射不動桿菌腺激-1Anti-ALB Antibody半乳凝12(GAL12)
孕激受體βMPRβ抗體Pseudozymaantarctica大鼠內臟脂肪組織提取物
前列腺F2a受體抗體PGF2αR新生隱球菌大鼠胎兒表皮組織提取物
神經叢蛋白B3抗體東方伊薩酵母大鼠皮下脂肪組織提取物
絲/蘇蛋白激PCTK2抗體季也蒙念珠菌大鼠表皮組織提取物
TMEM16A chloride通道抑制劑(Shikonin)奧氏蜜環 二苯基膦戊型肝炎病IgG抗體
中慢生根瘤屬 1-金剛烷羧戊型肝炎病IgM抗體
4-氟-3-甲氧基流行熱病抗體
異常畢赤酵母 1,4-二甲氧基-2-氟苯口蹄疫O型
蘇云金芽孢桿 4-(三氟甲氧基)球蛋白G抗體
豬丹絲 環己基苯組蛋白H3
兔出血癥病 N-乙基-N-(3-磺基)苯鈉鹽(ALPS)腸激
灰葡萄孢(灰霉病) 1-氨基蒽醌乙腦病抗體
膠孢 1-蒽醌肺表面活性物質相關蛋白a
炭疽芽胞桿 1-(甲氨基)蒽醌肺表面活性物質相關蛋白b
無色柱頂孢 2-環己酮肺表面活性物質相關蛋白c
芳香鐮孢 (S)-(-)-1-甲基-2-(1-萘氨基)吡咯烷
尤氏泰勒蟲(臨洮株-2) 雙(2-乙基)鹽鹽偽狂犬病
大腸埃希 十四烷二髓過氧化物
葡萄座腔 1,4-二-2-丁炔腺代琥珀合成
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