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貨號 | FS-X10882 |
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中文名稱:CDK9,CDK8和CDK7抑制劑(LY2857785)
英文名稱:LY2857785
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10882
產品介紹:
LY2857785是一種I型可逆的ATP競爭性的CDK9,CDK8和CDK7抑制劑,IC50分別為11nM,16nM和246nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1619903-54-6 純度:98.59% 分子量:448.6 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
布雷絲枝霉大鼠維生D2Anti-SH3RF3 Antibody人1(PRM1)
寄生曲霉小鼠神經肽YAnti-SHC1 Antibody人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)
榆干側耳、大榆磨人抗Sc1-70抗體Anti-SH3TC1 Antibody人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)
藤倉赤霉大鼠維生EAnti-SHANK2 Antibody人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)
根霉人Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體Anti-SHC2 Antibody人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)
加德那氏鏈霉菌小鼠生長激釋放多肽Anti-SHC1 Antibody人血小板相關補體3(PAC3)
谷棒桿菌大鼠維生AAnti-SHD Antibody人血小板相關補體3(PAC3)
圈卷產色鏈霉菌大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白Anti-SHLD2 Antibody人血栓A2(TX-A2)
新城疫病小鼠凝溶膠蛋白Anti-SHPK Antibody人血栓A2(TX-A2)
紅根須腹菌人抗核糖核蛋白抗體Anti-SIGLEC5 Antibody人血紅蛋白H(HbH)
膠孢人抗天然脫氧核糖核抗體Anti-SIGLEC7 Antibody人血紅蛋白H(HbH)
阪崎腸桿菌小鼠核因子κB受體活化因子配基Anti-SIK3 Antibody人血紅蛋白C(HbC)
枯草芽孢桿菌大鼠血小板因子4Anti-SIK3 Antibody人血紅蛋白C(HbC)
腐皮鐮孢菌小鼠血栓前體蛋白Anti-SIPA1 Antibody人纖維蛋白(Fibrin)
金龜子綠僵菌大鼠雙氫睪Anti-SIN3B Antibody人纖維蛋白(Fibrin)
桔橙鏈霉菌人抗可提取核抗原抗體Anti-SIRPG Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)
相關抗原57抗體雞樅(雞菌)AC-H12
TIP30蛋白抗體蘋果黑腐皮殼菌(斜面)ETMcAb4F11
跨膜和泛樣結構域蛋白1抗體厚環粘蓋牛肝菌2F11/A9
乳腺癌抗雌激抵抗蛋白2抗體金龜子綠僵菌(斜面)AhMcAb1F3
CDK9,CDK8和CDK7抑制劑(LY2857785)馬昆德擬青霉 2-氟-5-(三氟甲基)補體1q
大腸埃希氏 三氟磺銩華支睪吸蟲IgG抗體
灰黃鏈霉 4-氟-2-三氟甲囊尾蚴IgM
灰樹花 苯并-15-冠-5α半乳糖基抗原
蘑菇 乙酰肼β4
氨桿 2-基嘧啶甲型H3流感
光硬皮馬勃 1-甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷二(四氟)鹽甲型H1N1流感
盤長孢狀盤孢 4-(叔辛基)硫氧還蛋白相互作用蛋白
釀酒酵母 4-羧基苯硫氧還蛋白
臭椿尾孢 乙酰酮鐵(III)髓觸發受體2
Halomonas 二苯硫O型口蹄疫抗體
球孢白僵 4,4-二氨基二苯硫外信號調節激
拉浩爾谷農球 雙(三苯基膦)二化鈀(II)Ⅵ型膠原
棲熱屬 4-氨基二苯CD163分子
假根蘑菇 雙(三苯基膦)合化羰基銠(I)肝
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