產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：DC細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

貨號：FS-01X9876

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔溶菌(LZM)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔子催乳(PRL)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit prolactin,PRL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔子促黃體(LH)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit luteotropic hormone,LH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

兔p53(p53)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

兔阿霉(ADR)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔抑瘤M(OSM)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔血管生成2(ANG-2)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

兔血栓B2(TXB2)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
DC細胞SHOC2/Sur8  富含亮重復蛋白SHOC2抗體規(guī)格: 0.2ml

RAMP/CDT2  維甲調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關蛋白規(guī)格: 0.2ml

MTMR8  肌管相關蛋白8抗體規(guī)格: 0.2ml

NIFK  KI67相互作用蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-NIFK/MKI67IP(Thr234)  磷化KI67相互作用蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TACC1  乳腺癌、胃癌抗原GA55抗體規(guī)格: 0.2ml

ABCF3  三磷腺結合盒轉(zhuǎn)運蛋白F亞基3抗體規(guī)格: 0.2ml

ABHD1  肺α/β水解蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml