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貨號	FS-01S63225

商品介紹：

測定意義

CS（EC 2.3.3.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中，是三羧酸循環(huán)第一個限速酶，是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點之一。

測定原理

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰輔酶，進一步水解產(chǎn)生檸檬酸；該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB，在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：CS檸檬酸合酶檢測試劑盒可見分光光度法

規(guī)格：50管/24樣

檢測方法：可見分光光度法

貨號：FS-01S63225
QQ截圖20220307153604.png

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

豬血清轉(zhuǎn)運體(SERT)聯(lián)免疫試劑盒粗皮馬勃PRMT4/CARM1 Antibody

豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Oct-4A (C30A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)

豬Rap鳥交換因子1(RAPGEF1)聯(lián)免疫試劑盒紫紅曲霉CARD11 Antibody

豬核因子κB抑制蛋白β(IκBβ)聯(lián)免疫試劑盒蘇云金芽胞桿Phospho-Stat2 (Tyr690) Antibody

豬微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)聯(lián)免疫試劑盒金龜子假絲酵母Phospho-Stat2 (Tyr690) Antibody

豬6酮前列腺(6-K-PG)聯(lián)免疫試劑盒水冷源橙色單胞OB-Cadherin (P707) Antibody

豬原卟啉(EPP)聯(lián)免疫試劑盒阿木氏鏈霉CD3ε (CD3-12) Rat mAb

豬神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)聯(lián)免疫試劑盒香菇CD3ε (CD3-12) Rat mAb

豬核孔蛋白205kda(NUP205)聯(lián)免疫試劑盒釀酒酵母Autophagy Antibody Sampler Kit

豬腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)聯(lián)免疫試劑盒全食副球Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb

豬接觸蛋白2(CNTN2)聯(lián)免疫試劑盒類產(chǎn)假單胞CEACAM1 (D3R8O) Rabbit mAb

豬縮(ALD)聯(lián)免疫試劑盒啤酒酵母MRP2/ABCC2 (R260) Antibody

豬胰島樣生長因子1受體(IGF1R)聯(lián)免疫試劑盒蕈青霉AFP (D12C1) Rabbit mAb

豬水通道蛋白2(AQP-2)聯(lián)免疫試劑盒草菇RAD21 (L611) Antibody

豬性磷1(ACP1)聯(lián)免疫試劑盒 PelagibacteriumCaspase-4 Antibody
CS檸檬酸合酶檢測試劑盒可見分光光度法腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1抗體Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit藍6B鈉鹽

磷化原癌基因c-Jun抗體Human POTEG(POTE Ankyrin Domain Family Member G) ELISA KitDEAE纖維DE-52

周期A1蛋白抗體Human POTE-D(POTE-D(POTE Ankyrin Domain Family Member D)) ELISA KitDNA純化瓊脂糖凝膠FF

周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體Human FETUB(Fetuin B) ELISA Kit癸烷磺鈉

角蛋白42Human FG(Fibrinogen) ELISA Kit第威德合金

CD105抗體Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit人神經(jīng)營養(yǎng)因子4（NT-4）ELISA試劑盒,NT-4 ELISA kit

半胱蛋白蛋白-7抗體Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit人黑色瘤標(biāo)記物（MART/Melan-A）ELISA試劑盒,MART/Melan-A ELISA

CD8/CD8-β抗體Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit人轉(zhuǎn)谷酰2C多肽（TGM2）ELISA試劑盒,TGM2 ELISA kit