您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>抑制劑激活劑>> c-Met激酶抑制劑(Savolitinib)
貨號(hào) | FS-X10561 |
---|
英文名稱:Savolitinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號(hào):FS-X10561
產(chǎn)品介紹:
Savolitinib是c-Met激酶抑制劑,IC50值為5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號(hào):1313725-88-0 別名:Volitinib;HMPL-504;AZD-6094 純度:99.78% 分子量:345.36 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
腸桿菌屬鋅指蛋白471抗體Anti-MXD1 Antibody平滑肌肌動(dòng)蛋白γ2(ACTγ2)
竹喙球菌γ-基丁A受體相關(guān)膜蛋白3Anti-MYBL1 Antibody平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)
弧菌鋅指蛋白909抗體Anti-MYBL2 Antibody平滑肌蛋白3(LMOD3)
抗生鏈霉菌鋅指蛋白420抗體Anti-MYC Antibody平滑肌蛋白2(LMOD2)
生黃色鏈霉菌周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYBPC3 Antibody平滑肌蛋白1(LMOD1)
曲霉鋅指蛋白318抗體Anti-MYD88 Antibody能受體P2Y12(P2RY12)
鮑姆桑黃鋅指蛋白281抗體Anti-MYC Antibody能受體P2X7(P2RX7)
平臍蠕孢菌鋅指蛋白274抗體Anti-MYD88 Antibody霉敏感性肽(PSA)
亮白曲霉鋅指蛋白81抗體Anti-MYF5 Antibody皮質(zhì)3(CTXN3)
羅爾夫青霉鋅指蛋白148抗體Anti-MYD88 Antibody(PB0158)皮質(zhì)2(CTXN2)
扣囊復(fù)膜孢酵母鋅指蛋白342抗體Anti-MYD88 Antibody皮質(zhì)1(CTXN1)
擬棒形節(jié)叢孢鋅指蛋白350/癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體Anti-MYLK Antibody皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)
柱隔孢菌鋅指蛋白263抗體Anti-N Cadherin/CDH2 Antibody皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)
克魯斯假絲酵母鋅指蛋白195抗體Anti-NAB2 Antibody皮屑蛋白樣蛋白1(LEPREL1)
大腸埃希氏桿菌鋅指蛋白266抗體Anti-N WASP/WASL Antibody皮卡丘(Pikachurin)
樟疫霉鋅指蛋白786抗體Anti-NAA15 Antibody皮膚衍生肽抑制因子3(PI3)
嗅球蛋白1抗體頭葡萄球菌解脲亞種原代細(xì)胞提取物
含氧轉(zhuǎn)移1抗體木賊鐮孢人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白190抗體N端Amycolatopsisdecaplanina人食管上皮細(xì)胞提取物
有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ抗體Amycolatopsiskeratiniphilasubsp.keratiniphila人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞提取物
c-Met激酶抑制劑(Savolitinib)褐色諾卡氏 十二烷基三苯基溴化膦蛋白質(zhì)羧基
北方蜜環(huán) 2,4-二氟苯甲輪狀病
枝孢屬 三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)釹(III)巨噬炎性蛋白-1α
大腸桿 化銠病H7N9亞型抗體
產(chǎn)紅青霉 4-三氟基異酯病H5N1亞型抗體
草青霉 3-氧代環(huán)丁基叔丁酯4-羥基壬烯
蠟狀芽孢桿 化鏑(III),超干 (REO)促胰液
丁香葉點(diǎn)霉 2-羥基-3-氟吡啶低氧誘導(dǎo)因子-1α
微紫青霉 4-二氟甲氧基(易)血管緊張Ⅱ
中國(guó)臺(tái)灣根霉 鹽苯尼克酰腺二核磷氧化4
嗜麥芽黃單胞 3,3'-二硫代二二甲酯內(nèi)
曲霉 核因子κB抑制蛋白α
球孢白僵 環(huán)磺酰α轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
蘇云金芽孢桿 3--2,4-二氟核因子-κB亞基p65親和肽
枯草芽孢桿 1-N-Boc-2-基新孢子蟲抗體
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。