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特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
野兔熱(Tul)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10339 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
樹舌5-1培養基: 14模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
鹽單胞菌1.海洋石油污染生物修復; 4.生物活性物質篩選模式菌株: no沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 25℃
簡青霉培養基: 0013模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
嗜麥芽糖寡養單胞菌培養基: CM0002產淀粉酶提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 60℃ 真空冷凍干燥法
纖維堆囊菌作為粘細菌聚酮合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚酮基因的多樣性模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 844生長條件: 30℃
-352℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
金黃色葡萄球菌用于科研模式菌株: no患病奶牛提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 335生長條件: 37
羅伊赫海源菌培養基: 469potential antifouling 潛在的抗污損活性水樣/上層海水提供形式: 斜面培養物模式菌株: no生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
硫色曲霉生長條件: 25-28℃培養基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
青霉屬活性物質,卡斯帕酶7抑制活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0018生長條件: 26C
NICPBP44180致病菌芯片模式菌株: no種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 51生長條件: 37℃
微桿菌潛在的有機污染物降解菌/分離自32C烷烴富集菌群模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 821生長條件: 28℃
-353℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
大腸埃希氏菌培養基: 33分子生物學研究提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: yes生長條件: 37℃ 其他
巴斯德畢赤酵母培養基: 0013高效表達、分泌、脂肪酶提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
枯草芽孢桿菌生長條件: 35-37℃培養基: CM0003提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
本二價氫鉀potewwium xy7nogen phthalateAR500g
SCT-150-A1.5 ml 螺口尖底凍存管(雜色)(帶蓋)127
HK391-100Gxy7noxyetxyl Cellulose (HEC) 羥以級纖維素
Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
癸酰基-N-甲基葡糖胺1g
1,3-丙二醇1,3-propanediolGCS2ml
JX03021000 μl 硅化吸頭 袋裝182
C1254-5GCholic aicd wo7ium Salt 膽鈉
霍亂菌素1mg
UTP, Triwo7ium Salt
大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腺病3(ADV3)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit
丙二(MDA)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatMotilin,MTLELISA試劑盒大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA試劑盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanL-SelectinELISAKit人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒規格:96T/48T
野兔熱(Tul)核酸檢測試劑盒沙氏葡萄糖肉湯(SDB)規格:250g用途:用于藥品或生物制品中真菌的培養
李氏菌增菌肉湯(LB1)規格:9ml*20支/包用途:用于李氏菌二步增菌
動力-硝鹽培養基(B法)規格:250g用途:用于產氣莢膜梭菌的動力和硝鹽還原試驗
玉米瓊脂對照培養基規格:5.1g/300ml/袋用途:培養基適用性實驗
酵母浸粉規格:250g用途:培養基原材料,提供細菌生長所需的維生素B族
大腸桿菌生化鑒定條(GB)規格:4種*2*5條用途:用于大腸桿菌的生化鑒定
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