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貨號 | FS-X10341 |
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中文名稱:MEK1抑制劑(Cobimetinib)
英文名稱:Cobimetinib
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10341
產品介紹:
英文名稱:Cobimetinib 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Cobimetinib是一種有效的具有選擇性的MEK抑制劑,能夠抑制MEK1的活性,IC50值為4.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:934660-93-2 別名:GDC-0973;XL518 純度:98.79% 分子量:531.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
芽孢乳菌干粉擬南介金屬離子轉運蛋白抗體Human MIER2 腦源性神經生長因子(BDNF)
釀酒酵母中腦核仁蛋白抗體Human MIER1 腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)
豌豆根瘤菌肌球蛋白重鏈7抗體Human F12(Coagulation factor XII) 腦鈉(BNP)
微白黃鏈霉菌肌間蛋白1抗體Human MGAT1 腦紅蛋白(NGB)
河北鏈霉菌肌間蛋白2抗體Human MGAT4A 腦啡肽(ENK)
費氏中華根瘤菌肌球蛋白輕鏈激3抗體Human MGAT5B 腦腸肽(Ghrelin)
大腸埃希菌肌球蛋白輕鏈激2抗體Human MGEA5(Protein O-GlcNAcase) 腦腸肽(BGP/Gehrelin)
釀酒酵母絲裂原活化蛋白激3K10抗體Human MGAT4C 囊蟲病抗體(CYT Ab)
芽枝狀枝孢絲/蘇蛋白激MST4抗體Human mGluR1 難辨梭狀芽孢桿菌B(TOXB)
葡糖醋桿菌屬肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體Human KLK8(Kallikrein-8) 難辨梭狀芽孢桿菌A(TOXA)
雜色曲霉膀胱癌突變蛋白1抗體Human MFSD7 鈉-化物依賴性牛磺轉運體(SLC6A6/TAUT)
球孢白僵菌肌肉特定環指蛋白3抗體Human mGluR2 母親DPP同源物4(Smad 4)
栗疫菌腸分化相關因子1抗體Human MFSD8 末端脫氧核轉移(TdT)
樊慶生氏紅球菌環指蛋白62抗體Human MGAT4C 末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)
泛菌屬MHC I類鏈相關蛋白BHuman MGAT1 膜內酰基肽(ANPEP)
釀酒酵母膜蛋白MLC1抗體Human MGAT4A 膜聯蛋白A5(AnnexinA5)
膠孢Colletotrichum│gloeosporioides 質量規格:≥97% ,進分胡黃連III
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BR胡黃連II
海棍狀菌Maritimibacter│sp. 質量規格:>98%,BR胡黃連I
MEK1抑制劑(Cobimetinib)細孢毛霉 3-(3-吡啶基)-L-骨成型蛋白受體Ⅱ
球孢白僵 3-羥基鹽鹽骨鈣
木賊鐮孢 D(+)-乳糖一水合物骨堿性磷
仙人掌有孢漢遜酵母 3,4-二甲氧基苯骨橋
薔薇生鏈格孢 叔丁氧羰酰基6-氨基己骨特異性堿性磷
異常畢赤酵母 二甲基二乙氧基硅烷骨特異性堿性磷B
大麗輪枝孢 三苯基膦氫鹽骨涎蛋白
硫磺(硫色多孔) 2,5-二苯骨原交聯
瓶霉屬 血清胸腺因子固調節元件結合蛋白
馬德里毛殼 4-氨基-3-甲固調節元件結合蛋白1
大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二氟苯固調節元件結合蛋白1c
柿盤多毛孢 5-溴-8-硝基異喹啉固膽固轉運蛋白NPC1L1
毛耳白背 乙錳胱硫β-合成
沼澤紅假單胞 2,4-二氟苯過氧化氫
弓形蟲(GT0株) 苯基膦過氧化物
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