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貨號	FS-X10678

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：VEGFR2抑制劑(XL184)

英文名稱：Cabozantinib S-malate

產品規格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號：FS-X10678

產品介紹:

Cabozantinib S-malate是一種有效的VEGFR2抑制劑，IC50值為0.035nM，同時能夠抑制c-Met，Ret，Kit，Flt-1/3/4，Tie2和AXL的活性，IC50值分別為1.3nM，4nM，4.6nM，12nM/11.3nM/6nM，14.3nM和7nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：1140909-48-3

別名：XL184;Cabozantinib

純度：99.83%

分子量：635.59

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

雪腐鐮刀菌半胱蛋白蛋白-3（抗原）Anti-ARHGAP11A Antibody白介22受體α2(IL2Rα2)

黃曲霉半胱蛋白蛋白-6（抗原）Anti-ARHGAP1 Antibody白介22受體(IL2R)

鏈霉菌屬白介1-β轉化樣凋亡蛋白6（抗原）Anti-ARFGEF2 Antibody白介22(IL22)

曲霉平展變種白介1-β轉化樣凋亡蛋白6（抗原）Anti-ARHGAP17 Antibody白介21受體(IL21R)

卵孢柱枝孢半胱蛋白-10（抗原）Anti-ARHGAP18 Antibody白介21(IL21)

糞腸球菌半胱蛋白蛋白-13（抗原）Anti-ARHGAP9 Antibody白介20(IL20)

中度嗜熱雙突柄菌CD19Anti-ARHGDIA Antibody白介2(IL2)

葡萄孢霉屬雙鏈RNA腺脫基抗原（N端）Anti-ARHGEF10 Antibody白介1受體關聯激4(IRAK4)

管毛殼雙鏈RNA腺脫基抗原Anti-ARHGEF11 Antibody白介1受體關聯激3(IRAK3)

非洲黑蛋巢基質金屬蛋白9Anti-ARHGEF11 Antibody白介1受體關聯激2(IRAK2)

紫荊生葉點霉菌牛結核桿菌菌體蛋白Anti-ARHGEF12 Antibody白介1受體關聯激1(IRAK1)

香菇Muellerian抑制因子抗原Anti-ARHGEF12 Antibody白介1受體輔助蛋白樣蛋白2(IL1RAPL2)

子午線假單胞菌AEG-1抗原Anti-ARHGEF19 Antibody白介1受體輔助蛋白(IL1RAP)

口腔支原體血小板內皮黏附分子-1（抗原）Anti-ARHGEF16 Antibody白介1受體Ⅱ(IL1R2)

長野解支鏈淀粉芽孢桿菌脂肪組織分化相關蛋白抗原Anti-ARHGEF2 Antibody白介1受體Ⅰ(IL1R1)

扶桑本森頓酵母免疫球蛋白結合蛋白-1Anti-ARHGEF3 Antibody白介1家族成員9(IL1F9)

氧化裝配因子PET112抗體創傷弧菌人結腸MatchPair: 結腸上皮和腫瘤組織提取物

對氧磷3抗體約氏乳桿菌人肺MatchPair: 肺上皮和腫瘤組織提取物

朊蛋白CD230抗體Oleispiraantarctica人卵巢顆粒腫瘤細胞

枯草溶菌轉化1抑制劑抗體SphingomonaspituitosaSK-GT-2
VEGFR2抑制劑(XL184)白地霉五氟苯硫副結核抗體

短小芽孢桿五氟β-防御

Rhizobium 2,3,4,5,6-五氟苯α乳清蛋白

發酵乳桿 3-乙蛋清白蛋白

短芽孢桿 2-氟-6-硝苯副結核分枝桿抗體

異常漢遜酵母 1-金剛烷α-半乳糖

細鏈格孢 1-溴金剛烷異鎖鏈

硬毛栓孔 1,4-雙(二苯膦基)丁烷I型膠原蛋白

濟南諾卡氏三苯二酰基甘油

死亡谷芽孢桿 1,4-哌二乙磺二鈉鹽維生K

帽形黃色土桿 3-氟苯基γ-谷氨酰環化轉移

大腸埃希氏三苯基5-羥脯

黑根霉 (二甲基)苯基硅烷谷氨酰半胱連接

蟻巢傘屬三基硅烷合成

淺黃金色單胞基基硅烷肝型脂肪結合蛋白
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)