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貨號 | FS-X10731 |
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中文名稱:整合素αV抑制劑(CWHM-12)
英文名稱:CWHM-12
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10731
產品介紹:
CWHM-12是一種有效的αV integrins抑制劑,抑制αvβ8,αvβ3,αvβ6和αvβ1,IC50分別為0.2,0.8,1.5和1.8nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1564286-55-0 純度:98.97% 分子量:590.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
屎腸球菌沉默調節蛋白1抗原Anti-ECRG4 Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
金針菇S相激相關蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人前心鈉肽(Pro-ANP)
干酪乳桿菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4Anti-ECRG4 Antibody人角蛋白13(CK-13)
枯斑擬盤多毛孢碳氫鈉協同轉運蛋白4-A7抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白13(CK-13)
Lactococcus sp.線粒體促凋亡蛋白抗原Anti-EDNRA Antibody人角蛋白17(CK17)
匍匐曲霉乙酰轉運蛋白1抗原Anti-EEF1A1 Antibody人角蛋白17(CK17)
草青霉磷鈉協同轉運蛋白抗原Anti-EEF1B2 Antibody人制瘤M受體(OSMR)
Pseudarthrobacter運動神經元生存蛋白1抗原Anti-EEF1G Antibody人制瘤M受體(OSMR)
糞纖維單胞菌磷化Smad2抗原Anti-EEF1B2 Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
污黑腐皮殼Smad4抗原Anti-EEF2K Antibody人B淋巴瘤因子3(Bcl3)
平菇新宇711Smad 7(多肽)Anti-EFEMP1 Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
少根根霉磷化SMAD(p-Ser425)抗原Anti-EEF2K Antibody人癌蛋白誘導轉錄物3(OIT3)
曲霉突觸相關膜蛋白25抗原Anti-EFEMP2 Antibody人P27蛋白(P27)
褐色諾卡氏菌Snail蛋白抗原Anti-EFNA2 Antibody人P27蛋白(P27)
北方蜜環菌因子信號傳導抑制蛋白3抗原Anti-EFNA3 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
枝孢屬超氧化物歧化1抗原Anti-EFNB1 Antibody人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
前列腺癌相關蛋白4抗體泛養副球菌人膽管上皮癌細胞
線粒體導肽水解β抗體金黃亞種人胃腸道間質瘤細胞
富含脯蛋白15抗體日勾維腸桿菌人慢性髓系白血病細胞
香葉烯基轉移1β抗體解肝磷脂土地桿菌人永生化肝細胞
整合素αV抑制劑(CWHM-12)大腸埃希 4-(三氟甲基)芐溴鉤端螺旋體IgG
孢小克銀漢霉 二異基膦TH糖蛋白
地衣芽孢桿 4-氟三氟甲苯COL15A1
山茶盤孢 4-溴三氟甲苯對氧磷2
枯草芽孢桿枯草亞種 3,5-雙(三氟甲基)苯甲纖連蛋白1
淡紫擬青霉 3-氟三氟甲苯腎上腺
耐堿放線孢 2-甲酰基苯成纖維生長因子15
Bacillus tequilensis (甲氧基)三苯基化磷三磷腺
粟酒裂殖酵母 4'-氟-3'-乙酮一磷腺
黑曲霉 2,5-二羥基-1,4-二噻烷腺核
乙鈣不動桿 2-氟-4-甲苯過氧化氫
大腸埃希氏 5-氟-2-甲過氧化物
產氨短桿 5-氟ATP
果生鏈核盤 5-甲氧基靛紅成纖維生長因子21
根瘤 6-氟氨基轉移
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