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PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 14:56:56瀏覽次數:171次

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貨號 FS-X10485
PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)正在熱銷的產品:Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)苯 色標standard for GC ,>99.5% (GC)
FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝結合生長因子(性成纖維生長因子)(多肽片斷抗原)苯 98%
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)

產品介紹:

英文名稱:EPZ015666

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

EPZ015666是一種有效的PRMT5酶活性抑制劑,IC50為22nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1616391-65-1

純度:98.56%

分子量:383.44

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:PRMT5酶活性抑制劑(EPZ015666)

英文名稱:EPZ015666

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10485

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中國克魯維酵母淋巴管內皮和血管內皮受體1抗體Anti-Ferritin Antibody血栓烷受體(TP)

露濕漆斑菌鞭毛蛋白2抗體Anti-FES Antibody血栓A2(TXA2)

硬結節桿菌跨膜蛋白SEMA5A抗體Anti-FFAR1 Antibody血色病蛋白(HFE)

香菇IQCJ抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)

糞腸球菌*SH2結構域蛋白C3抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣P物質(SAP)

日本色鹽桿菌2型豬鏈球菌溶血抗體Anti-FGB Antibody血漿過氧化物(GPX3)

解鳥克雷伯菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合2(HO2)

綠色鏈霉菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合1(HO1)

多粘類芽孢桿菌葡萄糖-6磷轉運蛋白抗體Anti-FGF1 Antibody血紅結合蛋白(HPX)

枯草芽孢桿菌線粒體琥珀脫氫D抗體Anti-FGF1 Antibody血紅蛋白μ(HBμ)

叢毛紅曲類固硫酯抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白θ1(HBθ1)

腐質霉固調節元件結合蛋白裂解激活蛋白抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白ζ(HBζ)

傘枝犁頭霉轉運蛋白家族39成員7抗體Anti-FGF13 Antibody血紅蛋白ε1(HBε1)

迪吉氏黃桿菌碳氫鈉協同轉運蛋白4-A4突變型抗體Anti-Fgf19(Fgf15) Antibody血紅蛋白δ(HBδ)

木賊鐮刀菌磷化認知缺陷突觸相關蛋白SynGAP抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ2(HBγ2)

Sphingobium fuliginis Syndecan 3蛋白抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ1(HBγ1)

染色體結構維持蛋白2抗體空腸彎曲菌hFoB1.19:SV40轉染人成骨細胞

染色體結構維持蛋白5抗體液化MGC80-3人胃癌細胞

染色體結構維持蛋白6抗體黑曲霉 ACHN人腎癌細胞

SLAMF6抗體淺白隱球酵母3T3-L1小鼠脂肪細胞
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細麗擬盤多毛孢 六甘縮

釀酒酵母 3--2-氟磺脲類藥物受體

花楸盤多毛孢 5-甲氧基水楊轉化受體電位陽離子通道亞家族M成員4

果生鏈核盤 BOC-L-2-溴苯山梨脫氫

厄氏 N-乙基-2-氨甲基吡咯烷肌分化因子

核盤 Otilonium Bromide生肌因子5

枯草芽孢桿 L-(-)-α-氨基-ε-己內酰鹽鹽神經鞘磷脂

金黃色葡萄球 聚二烯二甲基化溶液核糖核A

伯頓生絲畢赤酵母 聚二烯二甲基化溶液核呼吸因子2

平菇 聚二烯二甲基化溶液二?;视王;D移2

香菇 聚二烯二甲基化溶液二?;视王;D移1

枯草芽孢桿 3-苯基-1H-吡唑-4-甲木聚糖

毛栓孔 2,3-二磷核糖焦磷

芽胞桿 八甘單甲單羧轉運蛋白

 


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