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P-糖蛋白抑制劑

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 13:41:21瀏覽次數:230次

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貨號 FS-X10733
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產品介紹:

Tariquidar methanesulfonate,hydrate是一種有效的特異性P-glycoprotein(P-gp)抑制劑,Kd為5.1±0.9nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:625375-83-9

別名:XR9576

純度:98.02%

分子量:892.99

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:P-糖蛋白抑制劑

英文名稱:Tariquidar methanesulfonate, hydrate

產品規格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10733

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

松杉靈芝信號轉導和轉錄激活因子5(STAT5)抗原Anti-EIF3D Antibody人生長調節致癌基因β/黑瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)

腐皮鐮孢信號轉導和轉錄激活因子6抗原Anti-EIF2B3 Antibody人生長調節致癌基因β/黑瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)

灰樹花(可訂購)斜面形式雌激硫轉移抗原Anti-EIF2S1 Antibody人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)

聚生殼菌類泛蛋白Anti-EIF3D Antibody人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)

孟氏假單胞菌磷化微管相關蛋白多肽Anti-EIF3E Antibody人胸腺白血病抗原(TLa)

葡萄座腔菌微管相關蛋白2抗原Anti-EIF3F Antibody人胸腺白血病抗原(TLa)

羅伊氏乳桿菌微管相關蛋白1A抗原Anti-EIF3J Antibody人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)

粉紅鉚釘菇新型抑癌基因(多肽)Anti-EIF3K Antibody人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)

黃孢平革菌轉錄因子7類似物2抗原Anti-EIF3K Antibody人足標記蛋白/足盂蛋白(PCX)

大腸埃希菌Tar DNA 結合蛋白43抗原Anti-EIF3K Antibody人足標記蛋白/足盂蛋白(PCX)

釀酒酵母固生蛋白抗原Anti-EIF3L Antibody人癌易感蛋白1(BRCA-1)

聚生殼菌內涎蛋白/內皮唾液蛋白抗原Anti-EIF4A1 pAb人癌易感蛋白1(BRCA-1)

土生類諾卡氏菌三葉肽因子3(多肽)Anti-EIF4E Antibody人T急性淋巴母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)

黑化鏈霉菌組織因子途徑抑制劑-2抗原Anti-EIF4EBP1 Antibody人T急性淋巴母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)

辣椒枯萎TGF-β誘導早期應答基因1抗原Anti-EIF4B Antibody人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)

海水芽胞桿菌轉移生長因子–β受體1抗原Anti-EIF4G1 Antibody人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)

泛樣蛋白Sumo2抗體黑曲霉人急性骨髓白血病細胞

泛樣蛋白Sumo3抗體曲霉大鼠滑膜細胞

骨形態發生抑制蛋白SOST抗體塔賓曲霉小鼠胚胎成纖維細胞

上皮鈉離子通道蛋白D/δENaC抗體宇佐美曲霉人胚肺成纖維細胞
P-糖蛋白抑制劑淺絳紅鏈霉 4--3,5-二硝基三氟甲苯CD4分子

節桿屬 2-氟-3-吡啶羧CD8分子

釀酒酵母 鄰氟苯甲酰神經營養因子3

平菇 4-硝基-3-三氟乙酰轉移

釀酒酵母 2-溴三氟甲苯γ-谷氨酰轉肽

放射形根瘤 2-氨基-5-苯甲脫氧吡啶;脫氧吡啶啉

炭疽芽孢桿 (-)-10-樟腦磺酰5α還原

玉黑粉 異煙酰鹽鹽狂犬病糖蛋白

大腸埃希氏 4-氟吡啶鹽鹽狂犬核蛋白

浸麻類芽孢桿 2-叔丁酯尿蛋白

泡盛曲霉 反-2-癸烯蛋白激A

畢赤酵母 2-噻吩乙酰半乳糖凝集3

枯草芽孢桿 2-賴氨酰氧化樣蛋白2

李色鏈霉 甲氧基乙酰幾丁質

根瘤屬 5-氟-8-羥基喹啉XIIa

 


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