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JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-20 16:10:20瀏覽次數:178次

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貨號 FS-X10638
JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)正在熱銷的產品:Human PAF (plaetactivating factor) 人血小板活化因子酰酰-2,4-二 99%
Human Endostatin 人內皮抑3-氧酯 98%
BNP(Human) 人腦鈉/腦鈉尿肽2-庚酮 98%
TNF- Alpha 人腫瘤壞死因子-α異丁異丁酯 98%
TNF- Beta 人腫瘤壞死因子-β5--2

產品介紹:

AT9283是一種多靶點抑制劑,抑制JAK2和JAK3的活性,IC50值分別為1.2nM和1.1nM;對Aurora A,Aurora B和Abl(T315I)也有作用。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:896466-04-9

純度:99.13%

分子量:381.43

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)

英文名稱:AT9283

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10638

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

Microbacterium marinilacus膠體金標記的兔抗親和Anti-TGFBR2 Antibody輔肌動蛋白α3(ACTN3)

交鏈孢辣根過氧化物標記的兔抗親和Anti-TGFBR2 Antibody輔肌動蛋白α2(ACTN2)

白腐墊殼孢Cy5.5標記的兔抗親和Anti-TGM2 Antibody輔肌動蛋白α1(ACTN1)

淤泥假單胞菌Cy7標記的兔抗親和Anti-TGM2 Antibody(PB0469)弗林蛋白(FUR)

異常漢遜酵母PE標記的兔抗親和Anti-TH Antibody(PB0470)封閉蛋白9(CLDN9)

貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Cy3標記的兔抗親和Anti-THBS1 Antibody封閉蛋白8(CLDN8)

棉子糖腸球菌Cy5標記的兔抗親和Anti-THBS1 Antibody封閉蛋白7(CLDN7)

黃曲霉生物標記的兔抗親和Anti-THBS2 Antibody封閉蛋白6(CLDN6)

胡椒枯萎病PE-CY5標記的兔抗親和Anti-THBS1 Antibody封閉蛋白5(CLDN5)

短波單胞菌屬APC標記的兔抗親和Anti-THBS2 Antibody封閉蛋白3(CLDN3)

傘枝犁頭霉Alexa Fluor 350標記的兔抗親和Anti-THPO Antibody封閉蛋白25(CLDN25)

黃褐紋白蟻傘Alexa Fluor 488標記的兔抗親和Anti-THPO Antibody封閉蛋白24(CLDN24)

乳明串珠菌Alexa Fluor 555標記的兔抗親和Anti-THPO Antibody封閉蛋白23(CLDN23)

串珠鐮孢*Alexa Fluor 647標記的兔抗親和Anti-THPO Antibody封閉蛋白22(CLDN22)

白僵菌PE-Cy5.5標記的兔抗親和Anti-Thrombospondin/THBS1 Antibody封閉蛋白20(CLDN20)

新疆斯克爾曼氏菌PE-Cy7標記的兔抗親和Anti-THY1 Antibody封閉蛋白2(CLDN2)

patatin樣磷脂1抗體蚯蚓芽胞桿菌人胚胎絨毛膜組織提取物

酪酪肽抗體蕈狀芽胞桿菌人胚胎滋養層組織提取物

羧化抗體耐久腸球菌(堅韌鏈球菌)人腎小管組織提取物

脫氫復合物X蛋白抗體盲腸腸球菌人輸尿管組織提取物
JAK2和JAK3抑制劑(AT9283)松杉靈芝 3-十二烷基噻吩5羥基乙

葡萄座腔 十四烷基基硫氫5羥色

釀酒酵母 硫銠溶液低氧誘導因子-2α

爪哇鏈霉 過鈉四水合物葡萄糖轉運蛋白2

矩圓黑盤孢 2-溴化茚游離脂肪

sto128(大球蓋菇) 2-氨基-3-吡啶β羥丁

灰藍毛霉 二氫乙錠熱休克蛋白27

污水溶桿 異辛乳脫氫

深紅酵母 BOC-D-谷5-叔丁酯血管性血友病因子

煙曲霉 喹吖啶酮剛果出血熱IgG抗體

黑曲霉 桃肺炎支原體抗體

腸沙門氏腸亞種嬰兒血清型 偶氮二羰基二嗎啉絲狀支原體抗體

黑曲霉 甲肉桂酯降鈣

根瘤屬 (R)-(-)-1-甲基-3-羥基吡咯烷甲狀旁腺

克魯斯假絲酵母 (S)-(+)-1-甲基-3-羥基吡咯烷維生D

 


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