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IDO通路抑制劑(Indoximod)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:13:14瀏覽次數:244次

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貨號 FS-X10563
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產品介紹:

Indoximod(D-1MT,NLG8189)是吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)通路的抑制劑,Ki值為19μM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:110117-83-4

別名:NLG-8189;1-Methyl-D-tryptophan

純度:98.98%

分子量:218.25

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:IDO通路抑制劑(Indoximod)

英文名稱:Indoximod

產品規格:250mg

貨號:FS-X10563

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

大腸埃希氏桿菌鋅指蛋白198抗體Anti-NCR1 AntibodyⅫ(F12)

蠟樣芽孢桿菌鋅指蛋白323抗體Anti-NDC80 AntibodyⅪ(F11)

棱柱散尾菌中華變型鋅指蛋白206抗體Anti-NCX1(SLC8A1) AntibodyⅩⅢB肽(F13B)

植物乳桿菌緊密粘連蛋白ZO-3抗體Anti-NCSTN AntibodyⅩⅢA1肽(F13A1)

*美味牛肝菌鋅指蛋白ZBT10抗體Anti-NDP52/CALCOCO2 AntibodyⅩⅢ(F13)

枯草芽孢桿菌鋅指蛋白BED抗體Anti-NDRG1 AntibodyⅩ(F10)

產朊假絲酵母鋅指蛋白217抗體Anti-NDRG2 AntibodyⅨ(F9)

水棲黃桿菌鋅指蛋白575抗體Anti-NDRG3 AntibodyⅧ(F8)

直絲紫鏈霉菌鋅指蛋白X染色體蛋白抗體Anti-NDRG1 AntibodyⅦ(F7)

脂肪桿菌抑制蛋白4抗體Anti-NDRG2 AntibodyⅥ(F6)

季也蒙假絲酵母果生變種透明帶黏附蛋白ZAN抗體Anti-NDUFB2 AntibodyⅤ(F5)

西弗冠孢酵母鋅指蛋白437抗體Anti-NDUFB5 AntibodyⅡ(F2)

德氏乳桿菌鋅指蛋白415抗體Anti-NECTIN3 Antibody凝血/抗凝血復合體(TAT)

小單孢菌鋅指蛋白46抗體Anti-NDUFA1 Antibody凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)

鼠李糖乳桿菌鋅指蛋白93抗體Anti-NECTIN2 Antibody檸檬合(CS)

嗜乙酰乙棒桿菌鋅指蛋白568抗體Anti-NECTIN4 Antibody檸檬(Citrin)

泛特異性蛋白Otubain2抗體中間普氏菌(不提供)人支氣管成纖維細胞提取物

卵巢癌相關基因1抗體綠葉假單胞菌人支氣管上皮細胞提取物

氧化應激誘導生長抑制因子1抗體紫芝(紫靈芝,中華靈芝)人肺大靜脈內皮細胞提取物

結腸癌過度表達蛋白1抗體變色栓菌(云芝)(斜面)人肺動脈成纖維細胞提取物
IDO通路抑制劑(Indoximod)聚生殼 2--4--3-蛋白磷2A

土生類諾卡氏 2--4-吡啶巰基轉移

黑化鏈霉 2-氟-3--5-氟吡啶肌酐

辣椒枯萎 乙基三苯基溴化磷環磷鳥

海水芽胞桿 敵草凝血

栗疫 (基膦)金基質金屬蛋白2

金灰青霉 Fmoc-N-甲基-L-天冬 4-叔丁酯凝血

鴨疫里氏桿 N-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶基質金屬蛋白2

禽腺病Ⅵ型 碳酐

大球蓋菇 硫鉻,水合肺炎病抗體

根霉屬 十二羰基三釕基質金屬蛋白抑制因子1

亮白曲霉 化镥(III)六水合物, REacton基質金屬蛋白9

曲霉 (s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-唑烷-2-酮白介27

磚紅鐮刀 1,1,1,5,5,5-六氟戊烷-2,白介16

氏假單胞 4-MU-sulfate K *1 g* [4-Methylumbelliferyl sulfate鈣調蛋白

 


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