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P-selectin抑制劑(PSI-697)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-23 15:37:00瀏覽次數:204次

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貨號 FS-X10892
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Human Elas

中文名稱:P-selectin抑制劑(PSI-697)

英文名稱:PSI-697

產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10892

產品介紹:

PSI-697是一個P-selectin抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:851546-61-7

別名:P-Selectin Inhibitor

純度:98.24%

分子量:367.83

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

果生鏈核盤菌大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡAnti-STEA2 Antibody人淋巴功能相關抗原3(LFA-3/CD58)

根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子βAnti-STEAP3 Antibody人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)

炭疽芽孢桿菌人沙眼衣原體Anti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)

葡萄座腔菌人S0鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白BAnti-STIM2 Antibody人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)

擬盤多毛孢Y9大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3Anti-STK Antibody人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌人S0鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白AAnti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)

白丘鏈霉菌大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1Anti-STK17B Antibody人載脂蛋白A1(apo-A1)

球孢白僵菌人前病整合位點1Anti-STK24 Antibody人載脂蛋白B0(apo-B0)

根瘤菌大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4Anti-STK32C Antibody人載脂蛋白B0(apo-B0)

Tarimoccocus大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體Anti-STK33 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)

密枝瑚菌人綠膿桿菌外AAnti-STK24 Antibody人白血病抑制因子受體(LIFR)

根瘤菌人流感病AAnti-STK36 AntibodyA(IgA)

魯氏不動桿菌大鼠尿激型纖溶原激活物Anti-STMN3 AntibodyA(IgA)

雷斯廷加假絲酵母大鼠尿激型纖溶原激活物受體Anti-STMN3 AntibodyG(IgG)

釀酒酵母人乙型肝炎表面抗原Anti-STK38L AntibodyG(IgG)

硫磺菌人抗乙型肝炎病核心抗體Anti-STMN4 AntibodyM(IgM)

髓系細胞觸發受體樣轉錄因子1抗體鏈格孢菌人腎臟腫瘤細胞

髓系細胞觸發受體樣轉錄因子2抗體根瘤菌雜交瘤(B類)

端粒相關蛋白2/端粒逆轉錄抗體白囊耙齒菌(斜面)抗人肝癌單抗HAb187

血小板反應蛋白2/凝血敏感蛋白2抗體串珠鐮孢菌抗人環孢菌A-17
P-selectin抑制劑(PSI-697)葡萄座腔 釕/Ru過氧化

委內瑞拉鏈霉 銠/Rh錳超氧化物歧化

土曲霉原變種 1,5-二氨基蒽醌垂草扁桃

枯草芽孢桿 錸/Re塞尼卡病抗體

土生空團* 鉑/Pt雌受體α

大豆慢生根瘤 苝-3,4,9,-四羧二酐雌受體β

金黃色葡萄球 鈀/PdD-乳糖

大腸桿 六氟磷苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷副結核病

變化考克氏 鉛/Pb新城疫

釀酒酵母 總磷/P病

茄勞爾氏 磷/P趨化

pTRV 2 蒽醌-1-磺鈉鈣調蛋白激Ⅱ

魚蛉假絲酵母 鎳/Ni蛋白激C

湖北擬酵母 2,6-二叔丁基蛋白激C

巨大芽胞桿 鈮/Nb胃蛋白a

 


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