商品介紹：

僅供科研實驗，不做其他用途！

HPLC注意事項：

1.流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45um或更細的膜過濾)。

2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用。

3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

4.使用緩沖溶液時，做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20ml以上。

5.長時間不用儀器，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如甲醇等)，因為純水易長霉。

6.每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。

7.C18柱不能進蛋白樣品，血樣、生物樣品。

8.堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法；①以異丙醇作溶劑沖洗：②放在異丙醇中間用超聲波清洗；

9.氣泡會致使壓力不穩，重現性差，所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。

10.如果進液管內不進液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進行流動相的清。

11.要注意柱子的PH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

12.更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。

胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)Human KLHDC4 ELISA Kit羅倫氏隱球酵母

B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13) Human KLHL32 ELISA Kit用途: 產正放線，G57可防治多種植物真菌病害惡臭醋桿菌

結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ) Human KLHL35 ELISA Kit金黃色亞種

免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89) Human KLHL34 ELISA Kit英文名稱: Modestobacter multiseptatus阿舒假囊酵母

免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23) Human KRT12 ELISA Kit純黃絲衣霉

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16) Human KLHL10 ELISA Kit英文名稱: Arthrobacter phenanthrenivorans紅冬孢酵母

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) Human KRT33B ELISA Kit英文名稱: Pseudomonas  frederiksbergensis大核青霉

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) Human KRT34 ELISA Kit英文名稱: Cunninghamella echinulata橘灰青霉

粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)Human KRT36 ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究色褐鏈霉菌

ω干擾(IFN-ω/IFNB)Human KLHL4 ELISA Kit英文名稱: Streptomyces canus宋氏志賀氏菌（暫無）

糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1) Human KLHL9 ELISA Kit英文名稱: Saccharomyces  cerevisiae季也蒙畢赤酵母

干擾調節因子(IRF) Human KLRF1 ELISA Kit英文名稱: Bacillus sp.偶發分枝桿菌偶發亞種

淋巴β(LTB) Human KRT40 ELISA Kit威氏李斯特氏菌

淋巴α(LTA) Human KPNA1 ELISA Kit英文名稱: Halosimplex carlsbadense布氏假單胞菌

CC趨化因子受體1(CCR1)Human KLRG1 ELISA Kit英文名稱: Syncephalastrum monosporum佐氏庫特氏菌

CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)Human KLHL28 ELISA Kit英文名稱: Deinococcus sp.熱帶伯克霍爾德氏菌

蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒磷化腫瘤易感候選基因3抗體硫皮膚(DS) 羅漢松黃 A.

平滑肌肌動蛋白(SMA)免疫試劑盒磷化CREB-1抗體硫皮膚(DS) 洛柯

嘌呤核磷化(PNP)免疫試劑盒磷化CREB-1抗體硫類肝(HS) 駱駝蓬

脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒磷化周期依賴性激6抗體硫類肝(HS) 落葉松樹脂
鬧羊花毒素V標準品Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit

產品規格：50次

發貨周期：1～3天

本試劑盒是一種采用Annexin V-Alexa Fluor 488與PI雙染法進行細胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。

細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面，這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨(PS)從細胞膜內轉移到細胞膜外，使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂，正常主要存在于細胞膜的內面，在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Annexin V具有易于結合到磷脂類如PS的特性，對PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的PS。PS轉移到細胞膜外不是凋亡所*的，也可發生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的，而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細胞非透過性熒光染料碘化丙啶不能通過完整的活細胞，但能夠對壞死和凋亡晚期的細胞進行染色， 因此通常將Annexin V與PI配合染色， 以區別凋亡早期細胞與壞死細胞和凋亡的晚期細胞。

操作步驟：

1、細胞樣品的準備：

a．對于貼壁細胞：小心收集細胞培養液到一離心管內備用。用胰消化細胞，至細胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細胞培養液，吹打下所有的貼壁細胞，并輕輕吹散細胞。再次收集到離心管內。1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的培養液，以避免吸走細胞。加入約1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞。

b．對于懸浮細胞：1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細胞。對于特定的細胞，如果細胞沉淀不充分，可以適當延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養液，以避免吸走細胞。加入約1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，并轉移到1.5毫升離心管內。再次離心沉淀細胞，小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細胞。再次加入1ml 4℃預冷的PBS，重懸細胞，再次離心沉淀細胞。

2、用去離子水按1:3稀釋Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去離子水)。

3、用 250μl Binding Buffer重新懸浮細胞，調節其濃度為 1×106/ml。

4、取 100μl的細胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。

5、混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘。

6、在反應管中加 400μl PBS，流式細胞儀(FACS)分析。

Annexin V-Alexa Fluor 488 PI雙染流式分析圖譜

Jurkat細胞用誘導凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI雙染流式分析圖譜

儲存條件：2～8℃，避光保存
注意事項：

①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用.