言情小说君子以泽,大主宰之灵路天蚕土豆,斗破苍穹续集

貨號	FS-X10988

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：KRAS-PDEδ抑制劑(Deltarasin)

英文名稱：Deltarasin

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10988

產品介紹:

Deltarasin是一種KRAS-PDEδ相互作用的抑制劑，能夠與PDEδ結合，Kd值為38nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：1440898-61-2

純度：95.95%

分子量：603.75

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

牛摩拉氏菌Escherichia coli大鼠D-乳脫氫(D-LDH)

FlavobacteriumEscherichia coli大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)

漢遜德巴利酵母Escherichia coli大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)

盤長孢狀盤孢Escherichia coli大鼠膽固(CH)

白鱗蘑菇Escherichia coli大鼠膽固(CH)

乳乳球菌乳亞種Escherichia coli大鼠甘油三酯(TG)

唾液乳桿菌Escherichia coli大鼠甘油三酯(TG)

梭形凸臍蠕孢Escherichia coli大鼠低密度脂蛋白(LDL)

毛霉Escherichia coli大鼠低密度脂蛋白(LDL)

香菇Escherichia coli大鼠高密度脂蛋白(HDL)

黑曲霉Escherichia coli大鼠高密度脂蛋白(HDL)

傷口諾卡氏菌Escherichia coli大鼠孕受體(PGR)

蘭鏈霉菌Escherichia coli大鼠孕受體(PGR)

粘滑菇屬Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅱ轉化(ACEⅡ)

松口蘑Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅱ轉化(ACEⅡ)

黑曲霉Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)

蛋白酪磷非受體型4抗體桑木層孔菌人胚肺細胞VA13細胞

6磷果糖激抗體氏針層孔菌小鼠皮下結締組織細胞

磷激1抗體勞埃德木層孔菌兔角膜前基質層成纖維細胞

磷變位1抗體平滑木層孔菌新生牛眼晶體上皮細胞
KRAS-PDEδ抑制劑(Deltarasin)交織木霉異鉤藤堿

葡萄座腔 (+)-異胡薄荷

節桿鹽藥根堿

病研所芽孢桿堪非3,4'-二-O-甲

小孢根霉華變種掌葉半夏堿戊

棘孢青霉氧基白屈菜季堿

類香味脫氧阿枯明

農研所芽孢桿異魚藤色烯異黃酮

玫瑰色野野村氏雪松

地科維爾氏原千金藤那布任堿

焦曲霉異葉波羅蜜環黃酮

野土地桿紫杉脂

嚙蝕艾肯漆黃；紫鉚

魯錐梗孢植酮

黃曲霉烏沙元洋地黃
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)