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貨號	FS-X10222

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Ac-AEVD-FMK(caspase 10 抑制劑)

英文名稱：Caspase 10 Inhibitors Z-AEVD-FMK

產品規格：20μl

貨號：FS-X10222

產品介紹:

英文名稱：Caspase 10 Inhibitors Z-AEVD-FMK

產品規格：20μl

：1135688-47-9

濃度：5mM in DMSO

分子式：C28H39FN4O10

分子量：610.6

純度：≥95%

儲存：-20℃，有效期24個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

污膠鼓菌人乙型肝炎表面抗原單克抗體（檢測）Human STOML1 大鼠骨織(Ostn)免疫試劑盒

白色沉積物桿菌人乙型肝炎e抗原單克（包被）抗體Human STK4 大鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒

根瘤菌人乙型肝炎e抗原單克（檢測）抗體Human STOM(Stomatin) 大鼠骨形態形成蛋白拮抗蛋白免疫試劑盒

拜氏醋桿狀菌小鼠抗人血紅蛋白單克抗體Human STK16 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒

貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型甲型流感病血凝抗體Human STXBP3 大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒

淡紫青霉磷化HER2受體抗體Human SULT1C2 大鼠骨特性堿性磷C端肽免疫試劑盒

谷棒桿菌Ⅰ型組蛋白去乙酰化4抗體Human SULT2B1 大鼠骨橋(OPN)免疫試劑盒

假單胞菌屬磷化HER2受體抗體Human SULT2A1 大鼠骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒

莖點霉屬磷化組蛋白去乙酰化8抗體Human SULT4A1 大鼠骨鈣(OT)免疫試劑盒

黃柄雞油菌HLA-DR抗體Human SUMF2 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌人類白抗原G抗體Human SUMF1 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌高遷移率族蛋白A2抗體Human TBXAS1(Thromboxane-A synthase) 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒

丁香直絲鏈霉菌高遷移率族蛋白B1抗體Human SUCLA2 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒

交鏈孢菌血紅氧合2抗體Human SUCLG2 大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)免疫試劑盒

白金針21HOXc8抗體Human SUCLG1 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

漏斗狀側耳（鳳尾菇）原癌基因H-ras抗體Human ARG1(Arginase-1) 大鼠骨保護(OPG)免疫試劑盒

核桃黃極毛桿菌Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson 質量規格：standard for GC,≥99.5%(GC)楊梅

土生類諾卡氏菌Nocardioides│terrigena 質量規格：Standard for GC,≥99.95%(GC)氧化槐果堿

大腸埃希氏菌DH5α/pcDNA-Gag-NC-C15S/C18SEscherichia│coli 質量規格：Standard for GC,≥99.5%(GC)莪術二
Ac-AEVD-FMK(caspase 10 抑制劑)香菇對甲苯磺酐精脫羧

雪白根霉 1-(2-)哌鹽鹽羧酯

柯達酵母屬 6,7-二甲氧基-1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉溶血磷脂

紫杉木齒 8-羥基久洛尼定抗C二型膠原抗體

pet-21a 7-溴-1-庚烯Ⅱ型膠原抗體

立枯絲核 BOC-L-4-氟苯正丁

溶血葡萄球肼乙酯2丁酮

釀酒酵母喹啉-6-甲脫氧核糖核Ⅰ

鏈格孢屬 5-甲基吡-2-羧甲酯谷氨酰基環化

ATCC 35030 (R)-2-氧代四-3-基芐酯apelin-12

釀酒酵母 N-Boc-L-高絲NADPH氧化

球黑孢 3-(2-乙基)-2-甲基-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-4-酮維生K

盤長孢狀盤孢 2,4-二甲氧基苯甲多巴轉運蛋白

沙漠類芽胞桿 4-甲氧基乙酰乙甲酯多巴D2

居泉沙雷氏 1,2,3,4-四氫異喹啉-1-羧γ氨基丁A型受體
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)