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貨號	FS-X10223

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Ac-LEED-FMK(caspase 13 抑制劑)

英文名稱：Caspase 13 Inhibitors Z-AEVD-FMK

產品規格：20μl

貨號：FS-X10223

產品介紹:

英文名稱：Caspase 13 Inhibitors Z-AEVD-FMK

產品規格：20μl

濃度：2mM in DMSO

分子式：C32H45FN4O12

分子量：696.7

純度：≥95%(HPLC)

儲存：-20℃，有效期12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

假單胞菌熱休克蛋白-60抗體Human SUMO2/3 大鼠還原(GR)免疫試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌熱休克蛋白-70抗體Human SUN1 大鼠過氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒

不等彎孢熱休克蛋白90α抗體Human SUOX 大鼠S轉移θ1(GSTT1)免疫試劑盒

根瘤菌熱休克蛋白90β/HSP90 β 抗體Human SYCE1 大鼠S轉移P(GSTP1)免疫試劑盒

薔薇放線孢*人巨病UL23抗體Human STT3A 大鼠S轉移Mu1(GSTM1)免疫試劑盒

頂孢頭孢霉HECA蛋白抗體Human SUPT16H 大鼠S轉移(GSTs)免疫試劑盒

香菇異質核糖核蛋白hnRNPA2抗體Human STT3B 大鼠(GSH)免疫試劑盒

齊藤假絲酵母異質核糖核蛋白U抗體Human STXBP2 大鼠谷酰合成(GLUL)免疫試劑盒

巨大芽胞桿菌人類狀瘤病16/18 E6抗體Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) 大鼠谷酰(Gln)免疫試劑盒

木賊鐮孢HA tag標簽抗體Human STXBP3 大鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒

克雷伯氏菌屬荷爾蒙敏感脂肪抗體Human STXBP4 大鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒

大腸菌群質控樣品血紅蛋白α1/α-Globin抗體Human IFI6(Interferon alpha-inducible protein 6) 大鼠谷脫羧1(GAD1)免疫試劑盒

德爾布有孢酵母Fas相互作用蛋白激2抗體Human STXBP5 大鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒

葡萄座腔菌Fas相互作用蛋白激3抗體Human STOML2(Stomatin-like protein 2) 大鼠谷免疫試劑盒

乳乳球菌乳亞種人類皰疹病8抗體Human STXBP6 大鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒

根瘤菌磷化熱休克蛋白27抗體Human SUFU 大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)免疫試劑盒

傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質量規格：standard for GC,≥99.6%(GC)朝藿定A1

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)黃柏堿

鹽棲鹽田菌Salinicola│salarius 質量規格：standard for GC,≥99.0%(GC)京尼平
Ac-LEED-FMK(caspase 13 抑制劑)薄黑孔 2-溴-1-（3-）乙酮谷脫羧65

釀酒酵母 2,3-二甲氧基苯谷脫羧67

釀酒酵母 3,5,6-三水楊多巴D2受體

平菇 3--2-丁酮tcf-4抗體

繩狀青霉二氟草鋰谷氨酰酰肽環轉移

淺黃隱球酵母 4-溴-3-鹽鹽蛋白質氧化羰基化

居真細 3-基-4-氟三氟甲苯泰澤病原體抗體

燼灰產色鏈霉 N-乙基-2-甲基弓形蟲抗體

叢毛單胞化N-辛基吡啶SYA674型四環

中國臺灣根霉 (S)-(-)-alpha-(Boc-氨基)-gamma-丁內酯球蛋白G3亞型抗體

密歇根棍狀桿標記亞種磷甲型肝炎病抗體

大腸埃希 4-溴-3-氟苯甲音猬因子

板栗蛇孢日規殼 2-甲氧基吡啶-4-頻哪酯谷氨酰

間型假絲酵母 4-甲基-5-羥基呋喃-2-酮磷肌3激

擴展青霉改名婁地青霉 5-甲基四氮唑Dectin-1蛋白
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)