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貨號 | FS-X10307 |
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Pexidartinib 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg Pexidartinib是KIT,CSF1R和FLT3的抑制劑,能夠作用于Fms和Kit,IC50分別為28和16nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1029044-16-3 別名:PLX-3397 純度:98.86% 分子量:417.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:KIT,CSF1R和FLT3抑制劑
英文名稱:Pexidartinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10307
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
草色串孢溶菌抗體Human IFITM3(Interferon-induced transmembrane protein 3) 胃抑(GIP)
多座蟲草*LAD1蛋白抗體Human PIAS1 胃內因子(GIF)
黑木耳胸腺生成LAP2抗體Human PIAS2 胃泌抗體(GCA)
黑曲霉富含亮重復蛋白6抗體Human PIAS3 胃泌釋放肽前體(ProGRP)
地下節(jié)桿菌低密度脂蛋白受體相關蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7)Human PIAS4 胃泌釋放多肽(GRP)
解淀粉芽孢桿菌磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PHLDA1 胃泌(Gastrin)
枯草芽孢桿菌低密度脂蛋白受體抗體Human PHLPP 胃泌(GAS)
瘦抗體Human PHLDA2 胃動(MTL)
小鏈霉菌腫瘤自身抗原LMO4抗體Human PHLPPL 胃動蛋白2(GKN2)
繩生毛殼淋巴特異性蛋白酪激抗體Human LRP8(Low-density lipoprotein receptor-related protein 8) 胃蛋白原C(PG-C)
釀酒酵母白免疫球蛋白樣受體8抗體Human PGRMC2 胃蛋白原A(PG-A)
黑木耳(186)白三烯B4受體1抗體Human PHKA2 胃蛋白(PP)
巨大芽孢桿菌白免疫球蛋白樣受體6抗體Human PHACTR4 胃蛋白(PG)
Candida淋巴活化基因-3抗體Human PHACTR1 胃蛋白(GT)
變平滑假絲酵母白相關免疫球蛋白樣受體1抗體Human PHAX 未甲基化寡聚脫氧核(CpG-ODN)
柴油食烷菌白分化抗原CD207抗體Human MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) 尾肢同源蛋白2(PYGO2/PP7910)
Staphylococcus│aureus 質量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)土貝母
嘴突凸臍蠕孢Exserohilum│rostratum 質量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)柴胡皂B2
葉氏假交替單胞菌Pseudoalteromonas│elyakovii 質量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)柴胡皂B1
KIT,CSF1R和FLT3抑制劑腐皮殼 咪唑并[1,2-A]吡啶-5-氨基雷帕霉靶蛋白C1
側耳 2,4-二苯丁酮周期依賴性激抑制因子2A
巴博乳桿 6-羥基-5-硝基煙胰島樣生長因子結合蛋白4
ATCC 10224 3-氨基-5-甲基-6-噠酪
大腸埃希 2-氨基噻唑-5-甲甲酯周期依賴性激抑制劑P16INK4a
香茅彎孢 頭孢替安鹽鹽腎母過度表達基因
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 3H-1,2-苯并二硫-3-酮-1,1-二氧化物糖原合激3α
分枝節(jié)桿 3--4-溴甲苯磷化糖原合成激3α
鼠傷門氏 TA97a 4-溴間苯二抗性磷2b
黃桿 2,4,7-三喹唑啉衰老相關β-半乳糖
墻壁圣格奧爾根 2--5-氟甲苯12羥二十烷四烯
枯草芽孢桿 異喹啉-3-甲5羥二十烷四烯
鐘器腐霉 5-巰基-1,2,3,4-四氮唑-1-甲基磺雙鈉鹽A型巴氏桿抗體
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