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ERBB家族抑制劑(Dacomitinib)

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:16:42瀏覽次數:226次

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貨號 FS-X10568
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產品介紹:

Dacomitinib是一種特異性的不可逆抑制劑ERBB家族抑制劑,作用于EGFR,ERBB2和ERBB4,IC50分別為6nM,45.7nM和73.7nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1110813-31-4

別名:PF-00299804;PF-299804

純度:99.91%

分子量:469.94

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

中文名稱:ERBB家族抑制劑(Dacomitinib)

英文名稱:Dacomitinib

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

貨號:FS-X10568

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

棕黑腐質霉花生四烯15脂氧合2抗體Anti-NOGOR(RTN4R) Antibody腦膜瘤基因1(MN1)

毛腿環銹傘硫氧還蛋白還原抗體Anti-Nogo A/RTN4 Antibody腦富含膜附著信號蛋白1(BASP1)

球孢白僵菌5-羥色受體2C抗體Anti-NOL3 Antibody腦啡肽2(NEP2)

蕈狀芽孢桿菌5-羥色受體5B抗體Anti-NONO Antibody腦啡肽(NEP)

黑曲霉絲/精相關核基質蛋白4抗體Anti-NOS1 Antibody腦多巴神經營養因子(CDNF)

維及尼鏈霉菌絲/精相關核基質蛋白3抗體Anti-NOS1 Antibody腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)

曲霉磷化絲/蘇蛋白激II β(casein kinase IIβ)抗體Anti-non-muscle Myosin IIB/MYH10 Antibody腦蛋白44(BRP44)

四川散斑殼單核蛋白5抗體Anti-NOS2 Antibody囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)

健康皮張抗原SAMD9蛋白抗體Anti-NOS2 Antibody囊泡乙酰轉運蛋白(VAChT)

尖孢鐮刀菌SARM1蛋白抗體Anti-NOS3 Antibody囊泡單轉運蛋白2(VMAT2)

間型彎孢染色質組裝因子1P155抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐氧化性能蛋白1(OXR1)

鏈格孢蛙皮降壓肽抗體Anti-NOTCH2 Antibody耐扭蛋白3A(TOR3A)

哈茨木霉信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐扭蛋白2A(TOR2A)

滑菇、光帽黃傘DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體Anti-NOTCH4 Antibody耐扭蛋白1B(TOR1B)

橙色綠屈擾菌絲/蘇蛋白激SRPK2抗體Anti-NOVA1 Antibody耐扭蛋白1A(TOR1A)

猴頭分化蛋白SEPT8抗體Anti-NOVA2 Antibody鈉協同轉運蛋白(NCCT)

視神經相關蛋白1抗體簡單芽孢桿菌人主動脈內皮細胞提取物

螺旋轉錄因子OTP抗體玫瑰色孫修琴菌人臍動脈內皮細胞提取物

少突膠質細胞轉錄因子3抗體綠針假單胞菌橙色亞種人大隱靜脈內皮細胞提取物

嗅覺受體家族5亞基1抗體嗜鹽螺旋桿菌人主動脈平滑肌細胞提取物
ERBB家族抑制劑(Dacomitinib)三葉草根瘤 3-氟-4-甲氧基苯鐵蛋白

Acinetobacter soli 雙(六氟乙基酮)合鎳(II),水合磷肌激

少根根霉原變種 甲次硫鈉 水合物病性關節炎抗體

異常漢遜酵母 3-磺基十四烷基二甲基網狀內皮增生癥病抗體

野牡丹尼爾氏酵母 亞鈣水合物可溶性Toll樣受體4

球孢白僵 鹽芐絲肼整合β1

大腸桿 化鈥(III)六水合物纖調蛋白

芽孢桿 反式二氨基二化鉑(II), Pt minE鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白

黑曲霉 磷鑭(III) 水合物 (REO)拓撲異構2

佛雷德里克斯堡假單胞 2-羧基苯鈣結合蛋白

釀酒酵母 3,5-二甲基-4- 硝基吡啶-2-甲β-骨膠原交聯

芹側耳(杏鮑菇) 乙二四乙鐵鈉鹽纖維蛋白

枯草芽孢桿 三氟磺鋱(III)水合物纖連蛋白

大腸埃希氏 Fmoc--4-甲不飽和脂肪

薄花邊傘 鹽伊伐布雷定神經肽Y

 


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