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貨號 | FS-X10861 |
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產品介紹:
RG2833是一種大腦滲透的HDAC抑制劑,抑制HDAC1和HDAC3的活性,IC50值分別為60nM和50nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1215493-56-3 別名:RGFP109 純度:99.43% 分子量:339.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱:HDAC抑制劑(RG2833)
英文名稱:RG2833
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10861
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
芽胞桿菌小鼠α半乳糖基抗原Anti-RAB29 Antibody人蛋白S(Protein S)
郝氏青霉大鼠胃腸癌標志物CA199Anti-RAB2B Antibody人蛋白S(Protein S)
福山假絲酵母人幽門螺旋桿菌IgMAnti-RAB31 Antibody人可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
蟲草大鼠血紅氧合1Anti-RAB29 Antibody人可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
惡臭假單胞菌小鼠β基己糖AAnti-RAB33A Antibody人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)
人相關蛋白AAnti-RAB35 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)
頂頭孢霉大鼠磷脂A2Anti-RAB34 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)
白絨紅蛋巢菌小鼠肺表面活性物質相關蛋白AAnti-RAB37 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)
焦曲霉小鼠克拉拉蛋白Anti-RAB38 Antibody人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)
總狀共頭霉大鼠組織因子途徑抑制物Anti-RAB40B Antibody人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)
耐輻射奇球菌人胃抑Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
散囊菌小鼠β半乳糖Anti-RAB3GAP2 Antibody人2,3-二磷甘油(2,3-DPG)
煙曲霉大鼠水通道蛋白5Anti-RAB3GAP1 Antibody人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)
釀酒酵母人胃泌釋放多肽Anti-RAB3IP Antibody人基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)
光滑青霉人胃泌釋放肽前體Anti-RAB41 Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
茯苓小鼠腎上腺Anti-RAB40B Antibody人Na+/H+交換體3(NHE3)
跨膜蛋白6B抗體美國大鐘菇人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞
腫瘤壞死因子誘導蛋白3相互作用蛋白1抗體青黃褐硬皮馬勃pCDNA3.1-his-TNFRSF4
瞬時受體電位通道蛋白4抗體地星TNFRSF4人源基因
神經元蛋白22抗體褐疣柄牛肝菌人小細胞肺癌細胞
HDAC抑制劑(RG2833)粉擬青霉 (S)-(-)-2-甲基-1-丁三葉因子
黑曲霉 3%NaCl阿拉伯糖主要組織相容性復合體Ⅱ類
果蔬汁 莠滅凈、嘧霉、乙酰磷、 多靈、死蜱、菊酯 3%NaCl胰胨水中性粒明膠相關脂質運載蛋白
網狀鐮孢 3%NaCl甘露氨肽N
枯草芽孢桿枯草亞種 9-溴蒽二肽基肽Ⅳ
*松乳菇 3%NaCl蔗糖γ-谷氨酰轉肽
蟲花棒束孢 3%NaCl阿拉伯糖氨肽A
乳乳球乳亞種 3%NaCl乳糖尿氮
華特拉根瘤 [1,3-雙(二苯基膦)烷]二化鎳(II)腸三葉因子
枯草芽孢桿 %NaCl胰胨水Na-K-ATP
Rhizobium miluonense 7%NaCl胰胨水層粘連蛋白
球座尾孢 無鹽胰胨水Ⅳ型膠原
腸膜明串珠 麥芽糖維生B12
釀酒酵母 1-溴-2,3,5,6-四氟苯口蹄疫病非結構蛋白3ABC抗體
柄籃狀 葡萄糖二肽基肽Ⅳ
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