商品介紹：

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司正在出售的產品：

環指蛋白41抗體　英文名；RNF4119號染色體開放閱讀框67抗體　英文名；C19orf67

環指蛋白43抗體　英文名；RNF4319號染色體開放閱讀框70抗體　英文名；QIL1/C19orf70

環指蛋白44抗體　英文名；RNF4419號染色體開放閱讀框71抗體　英文名；C19orf71

環指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體　英文名；RNF4519號染色體開放閱讀框73抗體　英文名；C19orf73

環指蛋白47抗體　英文名；RNF4719號染色體開放閱讀框75抗體　英文名；C19orf75

環指蛋白56抗體　英文名；RNF5619號染色體開放閱讀框77抗體　英文名；C19orf77

環指蛋白59抗體　英文名；RNF59/MID119號染色體開放閱讀框7抗體　英文名；ZC3H4/C19orf7

環指蛋白5抗體　英文名；RING519號染色體開放閱讀框80單克隆抗體　英文名；ANGPTL8

環指蛋白60抗體　英文名；MID219號染色體開放閱讀框80抗體　英文名；ANGPTL8

環指蛋白61抗體　英文名；RNF61/MKRN11號染色體開放閱讀框100抗體　英文名；C1orf100

環指蛋白62抗體　英文名；RNF62/MKRN21號染色體開放閱讀框103抗體　英文名；C1orf103

SW1116人結腸腺癌細胞環指蛋白67抗體　英文名；NEURL1號染色體開放閱讀框104抗體　英文名；C1orf104

環指蛋白6抗體　英文名；RNF61號染色體開放閱讀框105抗體　英文名；C1orf105

環指蛋白70抗體　英文名；RNF701號染色體開放閱讀框106抗體　英文名；C1orf106

環指蛋白74抗體　英文名；RNF741號染色體開放閱讀框109抗體　英文名；C1orf109

環指蛋白75單克隆抗體　英文名；RBX11號染色體開放閱讀框110抗體　英文名；C1orf110

環指蛋白75抗體　英文名；RBX11號染色體開放閱讀框111抗體　英文名；C1ORF111

操作步驟:

(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。