商品介紹：

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司正在出售的產品：

細胞因子受體樣因子1抗體  細胞色素P450 2C9抗體　英文名；CYP2C9

細胞質分裂付出蛋白1抗體  細胞色素P450ⅡJ2抗體　英文名；CYPIIJ2

細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2D抗體  細胞外基質蛋白FREM2抗體　英文名；FREM2

下頜發育不良綜合征相關蛋白FAKD3抗體  細胞信號轉導分子SMAD6抗體　英文名；SMAD6

纖維束1抗體  細胞質多聚腺苷酸結合蛋白4抗體　英文名；CPEB4

線粒體促凋亡蛋白抗體  細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2C抗體　英文名；CDKN2C/p18 INK4c

線粒體核糖體蛋白L20抗體  細小清蛋白抗體　英文名；Parvalbumin

線粒體核糖體蛋白S11抗體  纖維鞘相互作用蛋白2抗體　英文名；FSIP2

線粒體類核因子1/乳腺癌相關蛋白SGA-81M抗體  線粒體rRNA甲基轉移酶1抗體　英文名；MRM1

CD361抗體　英文名；CD361  突觸融合蛋白1B抗體　英文名；Syntaxin-1B

CD52抗體　英文名；CD52  兔IgG Fc單克隆抗體　英文名；Rabbit IgG(Fc specific,Heavy Chain)

C

EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞D83抗體　英文名；CD83  脫支酶同源蛋白DBR1抗體　英文名；DBR1

CENTD1蛋白抗體　英文名；CENTD1  外周髓鞘蛋白-22重組兔單克隆抗體　英文名；PMP22

Complexin II/復合素2抗體　英文名；CPLX2  微管蛋白抗體　英文名；beta Tubulin (Loading Control)

CSMD1抗體　英文名；CSMD1  微管相關末端結合蛋白2抗體　英文名；EB2

Cy5標記的腱調蛋白/軟骨調節素樣1蛋白抗體　英文名；TNMD, Cy5 conjugated  維甲酸相關孤兒受體α抗體　英文名；ROR alpha

DALRD3蛋白抗體　英文名；DALRD3  味覺受體蛋白家族2亞基5抗體　英文名；TAS2R5

操作步驟:

(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。