當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞系>>人細胞系>> DLD-1人結直腸腺癌細胞
貨號 | A01X703 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
---|---|---|---|
細胞形態 | 生長特性 貼壁細胞 | 規格 | 1×106cells/T25培養瓶 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
產品名稱 | DLD-1人結直腸腺癌細胞 | 貨號 | A01X703 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | DLD1:DLD-1 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
別稱 | DLD 1 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 成人 |
組織來源 | 結直腸腺癌上皮細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | DLD-1細胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細胞與HCT-15細胞相似,說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。DLD-1細胞和HCT-15細胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實,但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記一致改變或數目上一致改變。DLD-1細胞的CSAp陰性(CSAp-),p53抗原表達呈陽性(p53抗原產生了一個C→T點突變導致241位的Ser→Phe)。DLD- |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~24-48小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產品:
磷酸化p38調節/激活蛋白激酶抗體 英文名;phospho-MAPKAPK5 (Ser93)
磷酸化T淋巴細胞連接蛋白抗體 英文名;Phospho-BLNK (Tyr84)
磷酸化氨基末端激酶2抗體 英文名;phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)
磷酸化沉默調節蛋白1重組兔單克隆抗體 英文名;Phospho-SIRT1 (Ser47)
磷酸化蛋白激酶C α/β2重組兔單克隆抗體 英文名;Phospho-PKC alpha (Thr638)
磷酸化端粒酶結合蛋白P23抗體 英文名;phospho-p23 (Ser113)
磷酸化干擾素誘導的雙鏈RNA活化蛋白激酶抗體 英文名;Phospho-PKR (Thr446 + Thr451)
磷酸化紅細胞生成素受體抗體 英文名;phospho-EPO Receptor (Tyr485)
磷酸化鉀通道蛋白DRK1抗體 英文名;phospho-Kv2.1 (Tyr128)
磷酸化磷酸神經膜抗體 英文名;phospho-FXYD1 (Ser83)
卷曲螺旋結構域蛋白67抗體 英文名;CCDC67
卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD8抗體 英文名;CHCHD8
DLD-1人結直腸腺癌細胞顆粒酶B抗體 英文名;Granzyme B
口蹄疫病毒VP1抗體 英文名;FMDV VP1
跨膜蛋白174抗體 英文名;TMEM174
跨膜蛋白9超家族成員4抗體 英文名;TM9SF4
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。