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貨號 | A01X650 | 規格 | 1×106cells/T25培養瓶 |
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細胞形態 | 多邊形 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業或科研等非醫療目的。
產品名稱 | A673人橫紋肌瘤細胞 | 貨號 | A01X650 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | A673:A673 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | A673 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 女性,15歲 |
組織來源 | 肌肉;橫紋肌肉瘤 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 多邊形 |
詳情簡介 | A-673細胞是一株源自15歲女性的橫紋肌肉瘤的細胞株。A-673細胞在軟瓊脂上可形成克隆,亦能在免疫抑制血清處理的小鼠中成瘤。A-673細胞有四個以上的標志染色體,一個額外的F染色體和兩個異常的B染色體。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~28小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養:取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液,37℃ CO2培養密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產品:
CD98重鏈抗原抗體 磷酸化表皮生長因子受體重組兔單克隆抗體 英文名;phospho-EGFR (Ser695)
CHIC2蛋白抗體 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體 英文名;phospho-AKT1 (Tyr474)
CRB1蛋白抗體 磷酸化蛋白激酶底物相關蛋白抗體 英文名;phospho-HEF1 (Ser369)
Cullin3抗體 磷酸化鈣調節蛋白-1抗體 英文名;Phospho-Cardiac Troponin I (Ser23 + Ser24)
C型凝集素4家族E抗體 磷酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體 英文名;Phospho-RSK3 (Thr353 + Thr356)
DEF8蛋白抗體 磷酸化肌球蛋白輕鏈多肽4抗體 英文名;phospho-MYL12B (Ser20)
DHX58蛋白抗體 磷酸化緊密連接蛋白6抗體 英文名;phospho-Claudin 6 (Tyr219)
DNAJB12蛋白抗體 磷酸化酶β抗體 英文名;PHKB
APC-Cy5.5標記小鼠CD19單克隆抗體 卷曲螺旋結構域蛋白90A抗體 英文名;CCDC90A
APC-Cy7標記小鼠CD11b單克隆抗體 抗利尿激素1A抗體 英文名;AVPR1A
APC標記人CD16單克隆抗體 可溶性載質轉運蛋白2B1抗體 英文名;SLCO2B1
APC標記人CD58單克隆抗體 跨膜蛋白111抗體 英文名;TMEM111
APC標記小鼠CD274單克隆抗體 跨膜蛋白59抗體 英文名;TMEM59
A-Raf抗體 跨膜蛋白Smoothened抗體 英文名;SMO
ATP結合盒轉運家族蛋白9抗體 快速周期調節蛋白SPDYE1抗體 英文名;SPDYE1
ATP依賴的干擾素反應蛋白1抗體 賴氨酰氧化酶樣3抗體 英文名;LOXL3
A型流感病毒H1N1-M2蛋白抗體 類固醇5α還原酶2抗體 英文名;SRD5A2
BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3單克隆抗體 英文名;G-CSF
6號染色體開放閱讀框222抗體 甲基化樣蛋白2A抗體 英文名;METTL2A
7號染色體開放閱讀框30抗體 甲羥戊酸脫羧酶抗體 英文名;MVD
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