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貨號(hào)	FS-01X98521

中文名稱：MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒

英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500次

貨號(hào)：FS-01X98521

MTS是一種新型甲臜化合物，和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細(xì)胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜，通過(guò)測(cè)定甲臜的光譜吸收，進(jìn)而可以測(cè)定細(xì)胞的增殖情況。

產(chǎn)品介紹:

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1．本試劑盒是單溶液式細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑，主要成分包含MTS和一個(gè)電子耦合試劑，溶液的穩(wěn)定性強(qiáng)，反應(yīng)的靈敏度高。

2．操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí)，無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞，免去溶解步驟。

3．無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。

4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育，使顏色進(jìn)一步生成。

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃避光保存，有效期半年。

使用效果：

96孔板中加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104)，37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)，加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間，每孔中加入10μL的MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液。37℃孵育1-4小時(shí)。490nm波長(zhǎng)檢測(cè)光密度。

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 E.Coli Chromogenic Medium 1000ml M58103 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色

9cm平皿 M58104

大腸菌群顯色培養(yǎng)基 Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58105 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸菌群大腸菌群培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色

9cm平皿 M58106

大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 1000ml M58107 用于快速、準(zhǔn)確同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時(shí)，大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色

9cm平皿 M58108

TBX 培養(yǎng)基 TBX Agar 1000ml M58109 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時(shí)，顯蘭色

9cm平皿 M58110

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基 Total Genes Chromogenic Medium 250g M58111 用于快速、準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌顯紅色

9cm平皿 M58112

O157顯色培養(yǎng)基 O157 Chromogenic Medium 1000ml M58113 用于O157菌的顯色培養(yǎng)

9cm平皿 M58114

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml M58115 用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)

9cm平皿 M58116

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 Listera Chromogenic Medium 1000ml M58117 用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)

9cm平皿 M58118

金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基 Staphylococcus Chromogenic Medium 1000ml M58119 用于的顯色培養(yǎng)

9cm平皿 M58120

霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 1000ml M58121 用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)

9cm平皿 M58122

弧菌顯色培養(yǎng)基 Vibrio Chromogenic Medium 1000ml M58123 用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍(lán)色，其它弧菌顯無(wú)色。

坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基 Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium 1000ml M58124 用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng)，坂崎桿菌顯藍(lán)色，其它腸桿菌顯無(wú)色。

尿道定位顯色培養(yǎng)基 Urine Orientation Chromogenic Medium 1000ml M58125 用于分離和鑒別常見尿道致病菌

麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC) Sorbitol Maconkey Agar Base 250 M58126 用于大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))

A 1.25μg/支*5 M58127 添加于100ml HB0121中

1%亞碲酸鉀溶液 5ml*10 M58128 適量添加于HB0121

顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Homo sapiens (Human)

顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Mus musculus (Mouse)

顆粒體蛋白(GRN)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Granulin (GRN) 96T Rattus norvegicus (Rat)

心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Homo sapiens (Human)

心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Mus musculus (Mouse)

心營(yíng)養(yǎng)素樣細(xì)胞因子1(CLCF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)

同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Homo sapiens (Human)

同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Mus musculus (Mouse)

同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)

左右決定因子1(LEFTY1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Left/Right Determination Factor 1 (LEFTY1) 96T Homo sapiens (Human)

左右決定因子1(LEFTY1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Left/Right Determination Factor 1 (LEFTY1) 96T Mus musculus (Mouse)

左右決定因子1(LEFTY1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Left/Right Determination Factor 1 (LEFTY1) 96T Rattus norvegicus (Rat)

Cerberus蛋白(CER)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cerberus (CER) 96T Homo sapiens (Human)

Cerberus蛋白(CER)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cerberus (CER) 96T Mus musculus (Mouse)

Ht酶4(HTRA4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4) 96T Homo sapiens (Human)

紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythropoietin (EPO) 96T Rattus norvegicus (Rat)

MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒胞外超氧化物歧化酶(SOD3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3) 96T Mus musculus (Mouse)

組蛋白H4(H4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Histone H4 (H4) 96T Mus musculus (Mouse)