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貨號 | AXB10170 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產品名稱 | 貨號 | AXB10170 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HEK-293T/17:HEK293T17 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | HEK 293T/17 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 胎兒 |
組織來源 | 腎 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | 293T/17細胞株是293T細胞株的衍生株,293T是293 [HEK-293]細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉衍生株。293T細胞進行克隆,檢測pBND和pZAP載體,得到一株能生成高滴度感染逆轉錄病毒的衍生株293T/17細胞。293T/17細胞持續(xù)表達猿病毒40(SV40)大T抗原,而因其高轉染能力篩選到17號克隆。293T/17細胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體轉染得到ANJOU65細胞株,ANJOU65細胞再用pCRIPgag-2和pGPT2E載??? |
生物安全等級 | 2 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
注意事項 | 該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正常現(xiàn)象,請按照收貨處理。 |
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產品:
水通道蛋白4單克隆抗體 英文名;Aquaporin 4Pacific Blue標記小鼠CD102單克隆抗體 英文名;mouse CD102/Pacific Blue
水通道蛋白4抗體 英文名;Aquaporin 4Pacific Blue標記小鼠CD103單克隆抗體 英文名;mouse CD103/Pacific Blue
水通道蛋白5抗體 英文名;Aquaporin 5Pacific Blue標記小鼠CD105單克隆抗體 英文名;mouse CD105/Pacific Blue
水通道蛋白-7抗體 英文名;AQP7Pacific Blue標記小鼠CD117單克隆抗體 英文名;mouse CD117(c-Kit)/Pacific Blue
水通道蛋白8抗體 英文名;Aquaporin 8Pacific Blue標記小鼠CD11b單克隆抗體 英文名;mouse CD11b/Pacific Blue
水通道蛋白-9抗體 英文名;AQP9Pacific Blue標記小鼠CD11c單克隆抗體 英文名;mouse CD11c/Pacific Blue
水蛭素抗體 英文名;HirudinPacific Blue標記小鼠CD19單克隆抗體 英文名;mouse CD19/Pacific Blue
順氯氨鉑耐藥相關蛋白9抗體 英文名;CRR9Pacific Blue標記小鼠CD31單克隆抗體 英文名;mouse CD31/Pacific Blue
瞬時表達軸索糖蛋白1抗體 英文名;TAG1Pacific Blue標記小鼠CD38單克隆抗體 英文名;mouse CD38/Pacific Blue
瞬時受體電位蛋白12抗體 英文名;TRP12/TRPV4Pacific Blue標記小鼠CD45.1單克隆抗體 英文名;mouse CD45.1/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體 英文名;TRPM2Pacific Blue標記小鼠CD45.2單克隆抗體 英文名;mouse CD45.2/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白1抗體(M亞家族) 英文名;TRPM1Pacific Blue標記小鼠CD45R單克隆抗體 英文名;mouse CD45R/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白3(M亞家族)抗體 英文名;TRPM3Pacific Blue標記小鼠CD45單克隆抗體 英文名;mouse CD45/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白4抗體(M亞家族) 英文名;TRPM4Pacific Blue標記小鼠CD4單克隆抗體 英文名;Mouse CD4/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白5抗體(M亞家族) 英文名;TRPM5Pacific Blue標記小鼠CD54/ICAM-1單克隆抗體 英文名;mouse CD54/ICAM-1/Pacific Blue
人胚腎細胞;HEK-293T/17瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體 英文名;TRPC6Pacific Blue標記小鼠CD62L單克隆抗體 英文名;mouse CD62L/Pacific Blue
瞬時受體電位離子通道蛋白7抗體(M亞家族) 英文名;TRPM7Pacific Blue標記小鼠CD69單克隆抗體 英文名;mouse CD69/Pacific Blue
瞬時受體電位通道1抗體 英文名;TRPC1Pacific Blue標記小鼠Ly-6A/E單克隆抗體 英文名;mouse Ly-6A/E/Pacific Blue
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