商品介紹：

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司正在出售的產品：

類固醇5α還原酶1抗體　英文名；SRD5A1A激酶錨定蛋白5抗體　英文名；AKAP5

類固醇5α還原酶1抗體(5α-Reductase 1)　英文名；SRD5A1A型鉀離子通道調節蛋白4抗體　英文名；KCNIP4

類固醇5α還原酶2抗體　英文名；SRD5A2A型流感病毒（H9N2）血凝素HA1抗體　英文名；H9N2 Hemagglutinin HA1

類固醇硫酸酯酶抗體　英文名；Steroid sulfataseA型流感病毒H1N1-M2蛋白抗體　英文名；H1N1 Matrix Protein 2

類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體　英文名；FKBP51A型流感病毒H3N2-M2蛋白抗體　英文名；H3N2 Matrix Protein 2

類固醇受體激活蛋白2抗體　英文名；NCOA2A型流感病毒H5N1凝集素抗體　英文名；H5N1 Hemagglutinin

類固醇受體激活蛋白3抗體　英文名；SRC3A型流感病毒H5N6凝集素　英文名；H5N6 hemagglutinin

類固醇脫氫酶樣蛋白1抗體　英文名；HSDL1A型流感病毒H7N9凝集素抗體　英文名；H7N9 NA

類固醇脫氫酶樣蛋白NSDHL抗體　英文名；NSDHLA型流感病毒H9N1血凝素型抗體　英文名；H9N1 Hemagglutinin

HTR-8/SVneo人絨毛膜滋養層細胞類胡蘿卜素裂解雙加氧酶8抗體　英文名；ZmCCD8A型流感病毒PB1-F2抗體　英文名；Influenza A PB1-F2

類腫瘤性抗原MA3抗體　英文名；PNMA3A型流感病毒蛋白PA-X抗體　英文名；Influenza A Protein PA-X

類腫瘤性抗原MA5抗體　英文名；PNMA5A型流感病毒非結構蛋白1抗體　英文名；Influenza A Nonstructural Protein 1

冷休克蛋白DBPA抗體　英文名；DBPAA型流感病毒核蛋白抗體　英文名；H1N1 Nucleoprotein

冷休克結構域蛋白C2抗體　英文名；CSDC2A型流感病毒核輸出蛋白抗體　英文名；Influenza A Nuclear export protein

冷誘導RNA結合蛋白抗體　英文名；CIRBPA型流感病毒核衣殼蛋白抗體　英文名；H1N1+H3N2 nucleocapsid protein

離子鈣接頭蛋白單克隆抗體　英文名；AIF1 (9A3)A型流感聚合酶堿性蛋白2抗體　英文名；Influenza A Polymerase basic protein 2

離子鈣接頭蛋白抗體　英文名；AIF1/Iba1B Raf單克隆抗體　英文名；BRAF

離子通道蛋白Kv1.3抗體　英文名；KCNA3B Raf抗體　英文名；BRAF

操作步驟:

(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。