北京眾力挽生物科技有限公司
郝運興
Thermo NanoDrop one紫外/可見分光光度計
檢測時選擇不同檢測模式，可以得到zui快速的結(jié)果：
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（mass extinction coefficient）方可計算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標準曲線并計算R square，待測蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請詳閱試劑說明書并制備不同濃度的標準品，在*時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標準曲線。每個標準曲線zui多可有七個標準品，每個標準品zui多可做五重復(fù)。
* 測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用 2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes 低塵擦拭紙（編號： 34155 ）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
濃度范圍：
Thermo NanoDrop one紫外/可見分光光度計
樣品種類 | zui低濃度 | zui高濃度 （超過時請稀釋樣品） | 再現(xiàn)性 （五重復(fù)以上） |
核酸 | 2 ng/ul | 15000 ng/ul （dsDNA） 12000 ng/ul （RNA） | 濃度范圍在 2-100 ng/ul 時，SD為 ± 2 ng/ul 濃度范圍大于 100 ng/ul 時，CV為 ± 2% |
純BSA | 0.10 mg/ml | 100 mg/ml | 濃度范圍在 0.05-10 mg/ml 時，SD為 ± 0.10 mg/ml 濃度大于 10 mg/ml 時，CV為 ± 2% |
蛋白質(zhì)，以BCA方式定量 | 0.2 mg/ml | 8.0 mg/ml | CV：± 2% （在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然） |
蛋白質(zhì)，以modified Lowry方式定量 | 0.2 mg/ml | 4.0 mg/ml | CV：± 2% （在可偵測的濃度范圍內(nèi)皆然） |
蛋白質(zhì)，以Bradford方式定量 | 100 ug/ml | 8000 ug/ml | 濃度范圍在 100-500 ug/ml 時，SD為 ± 25 ug/ml 濃度大于 500 ug/ml 時，CV為 ± 5% |
蛋白質(zhì)，以Mini Bradford方式定量 | 15 ug/ml | 100 ug/ml | 濃度范圍在 15-50 ug/ml 時，SD為 ± 4 ug/ml 濃度大于 50 ug/ml 時，CV為 ± 5% |
技術(shù)參數(shù)：
檢測孔測量時:
1、波長范圍: 190-840nm；
2、波長精度: 1nm；
3、分辨率: <1.8 nm （FWHM at Hg 253.7 nm）；
4、其它: 1mm光程長度（可自動調(diào)整到0.05mm）；
5、檢測下限：2ng/μl（dsDNA）；
6、檢測上限：15000ng/μl（dsDNA）；
7、吸光率精確度：0.002 absorbance （1mm光程）；
8、吸光率準確性：2%（at 0.76 at 257 nm）；
9、吸光率范圍：0.02-300 （相當于10mm光程）；
10、核酸檢測周期：< 5s；
11、體積：14cm×20cm。
比色杯測量時：
1、光柱高度：8.5 mm；
2、控溫精確，37 ± 0.5 °C；
3、攪拌速度: 150 – 850 rpm;
4、四種光徑可供選擇，分別為1，2，5，10mm；
5、吸光率范圍：0.002 – 1.5；
6、檢測下限：0.4 ng/μl （dsDNA）；
7、檢測上限：750 ng/μl （dsDNA）；
8、檢測時間：< 3 s；
9、重量：2.1 kg.
