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上海金穗生物科技有限公司
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柯薩奇病毒抗體IgG(CXV Ab-IgG)檢測

時間:2012/10/10閱讀:479
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[測定方法]  ELISA法

    [方法學原理]  在微孔板上預包被純化的柯薩奇病毒抗原,樣本中的CXVAb-IgG可與微孔板上抗原結合,加入酶標抗體后,與抗原抗體復合物結合,在顯色劑作用下顯色,顏色的深淺與樣本中抗體含量呈正相關。
    [標本準備]  靜脈抽血2ml,不抗凝。
    [試劑]
    1.微孔板
    2.樣品稀釋液
    3.酶聯試劑
    4.陰性對照
    5.陽性對照
    6.洗滌劑
    7.TMB顯色液
    8.終止液
    [儀器設備] 酶標儀或全自動酶聯免疫檢測儀。
    [測定步驟]
    1.取標本稀釋液100yl,加入反應孔內(陰性對照、陽性對照直接加入100ul對照血清),待檢血清各取10ul加入反應孔內,置37℃環境中反應20min。
    2.用洗板機洗滌5次,拍干。
    3.每孔加入100tA酶結合物,置37℃環境中反應20min。
    4.洗板5次,拍干。
    5.將底物A、B各50u1加入反應孔內,置避光顯色lOmin。
    6.每孔加入終止液50rtl,混勻終止反應。
    7.空白對照孔調零,用450nm波長檢測各孔 OD值,取臨界值(cut off)=0.10+陰性對照平均OD值(陰性對照<0.05按o.05計算)。檢測標本OD值<臨界值時,檢測結果為陰性;標本檢測值≥臨界值時,檢測結果為陽性。
    [正常參考值]  CXVAb-IgG陰性
    [注意事項]
    1.使用前試劑盒應預先在室溫環境中平衡30min。
    2.試劑盒在2~8C避光保存,啟用后應盡快用完。
    3.不同批次的試劑組分不能混用。
    4.實驗后試劑、血清標本均應視為有傳染性物質。   
    5.用滴瓶滴加時,滴瓶應垂直,用力和速度應均勻,加樣后充分混勻。
    [臨床意義]  柯薩奇病毒特異性抗體IgM出現早,消失也快,該抗體陽性提示現癥感染,有早期診斷價值??滤_奇病毒特異性IgG為中和抗體,陽性提示既往感染,但檢測患者急性期及恢復期雙份血清抗體效價升高4倍有診斷意義。

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