大鼠內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒說(shuō)明書

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大鼠內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒說(shuō)明書

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（400μg/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說(shuō)明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(gè)

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒說(shuō)明書

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

200μg/L	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100μg/L	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50μg/L l	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
25μg/L	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12.5μg/L	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒說(shuō)明書相關(guān)產(chǎn)品：

小鼠血纖蛋白原（Fbg）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α （sm Actinin-α）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠肌球蛋白（Myosin）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠結(jié)蛋白（Des）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類（MHCⅠ/H-2Ⅰ）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78（ENA-78/CXCL5）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠抗*Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠神經(jīng)肽Y（NP-Y）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠凝溶膠蛋白（Gelsolin）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠血栓前體蛋白（TpP）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠*釋放激素（GnRH）ELISA試劑盒 96T48T
小鼠抑制素B（INH-B）ELISA試劑盒 96T48T

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