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上海博研生物*的“A-375細胞,人惡性黑色素瘤細胞”代理商,提供細胞的報價,咨詢。 咨詢選購。
產品名稱:A-375細胞,A-375細胞
產品用途:科研
保證運輸中細胞的正常生長,關于其價格、報價、貨期,請咨詢我們。
產品特點:活性好、存活率高、實驗成果特征明顯
產品來源:人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動物組織
產品運輸:免費快遞
產品包裝:瓶裝
產品用途:細胞培養研究
細胞周期的DNA檢測
Ⅰ、樣品準備 準備以下一種或幾種樣品
A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)
B、組織培養細胞
C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞
Ⅱ、反應體系-DNA低滲緩沖液
檸檬酸三鈉 0.25g
Triton-X 100 0.75ml
Propidium iodide 0.025g
核糖核酸酶 0.005g
蒸餾水 250ml
我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數月后并無發現有任何染色活性的丟失
Ⅲ、染色
1、 每一個管子中放入1×106個細胞;
2、 樣品離心后盡可能*地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊; 3、 入1ml的DNA低滲染色(可用甲基綠進行染色)緩沖液至沉淀中,并混勻;
4、 樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個小時以備流式細胞儀分析 。
注意:延長在低滲緩沖液的曝光時間會引起樣品碎片的增加
A-375細胞,A-375細胞傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%*+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉*,加培養基混勻分瓶,T25瓶中加培養基至6-8ml,T75瓶加培養基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養。
郵購備注: 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若有懸浮的細胞,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清,剛接到細胞時血清濃度可以在15%。本產品經過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測。
我們將為客服提供全面的細胞計數、細胞染色、(MTT)比色法、細胞培養、細胞污染、常規生物材料細胞毒性實驗等等細胞實驗技術服務。
細胞復蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。
具體操作 (一)實驗前準備: 1.將水浴鍋預熱至37℃ 2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。 3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
(二)取出凍存管: 1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。 2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
(三)迅速解凍: 1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。 2.約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。
(四)平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min。
(五)制備細胞懸液: 1.吸棄上清液。 2.向離心管內加入10ml培養液,吹打制成細胞懸液。 (六)細胞計數: 細胞濃度以5×105/ml為宜。
(七)培養細胞 將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續培養培養,換液的時間由細胞情況而定。
初學者易犯錯誤: 1.水浴鍋未預熱或者未預熱到37℃。 2.水浴鍋內凍存管太多,導致傳熱不佳,使融化時間延長。 3.離心前忘記平衡,導致離心機損壞和細胞丟失。 4.一次復蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導致細胞交叉污染。
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