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234次我們增加了一步保護酶標板的程序。在10mM的磷酸鹽中加入適量的糖、無關蛋白質、ELISA試劑盒*以及二價金屬離子,作為酶標板保護劑,在封閉完后加入保護液于4℃冰箱中孵育過夜,同時與未做保護的酶標板進行對照,然后將保護的及未保護的酶標板置于37烘箱中放置15天,考察保護液對酶標板的穩定性的影響。
不僅由于在凍干的過程中會影響酶標抗體的活性,而且在臨床應用中頗為不便。適當的緩沖液以及添加無關蛋白質、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會對對酶標抗體的活性起一定的保護作用,因此我們設計了一組保護劑用于保護酶標抗體,ELISA試劑盒與未添加任何糖蛋白的酶標抗體做對照,將經保護的酶標抗體及未保護的酶標抗體置于37℃烘箱中放置6天,考察保護液對酶標抗體的影響。
包被抗原時,為了得到*的包被效果,我們采用了碳酸鹽緩沖液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩沖液(50mM ph7.6)、以及TRIS鹽酸緩沖液(50 mM ph7.6)三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動酶標儀分析,選擇*的包被緩沖液系統。同時為了保證緩沖液能夠長期保存,我們在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。ELISA試劑盒酶標板經過封閉后在低溫下僅能存放2周左右,為了延長固相酶標板上抗原的穩定性,
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