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小鼠ELISA試劑盒等你來(lái)挑

時(shí)間:2013/11/22閱讀:299
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(1)的固相載體的選擇:許多材料可作為固體載體,如聚氯乙烯,聚苯乙烯,聚丙酰胺和纖維素等。在凹孔板,形成管,珠等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管小鼠ELISA試劑盒何種載體,過(guò)濾之前,可以使用:抗原相同量的反應(yīng),在相同的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行,以觀察是否顯色反應(yīng)的均勻性,從而小鼠ELISA試劑盒確定吸附性能好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:抗體(或抗原)吸附在固相載體表面,純度要求更好的吸附,值在9 ~ 9。6一般要求。吸附溫度,時(shí)間和蛋白質(zhì)的含量也有一定的影響,18~24小時(shí)4℃一般使用。蛋白涂層的*濃度為滴定法:采用不同的蛋白濃度(0。1,1和10μ/),在其他實(shí)驗(yàn)條件相同,陽(yáng)性樣品的值。選擇蛋白含量zui少的值。對(duì)于大多數(shù)的蛋白質(zhì),通常1 ~ 10μ/。
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接法滴定。初始滴度(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體的一部分)。然后固定其他條件或采取“方法”(涂層的參考和酶標(biāo)抗體,樣品的不同稀釋?zhuān)?zhǔn)確滴定濃度在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。
(4)酶的底物和氫供體的選擇:氫供體的選擇要求是廉價(jià)的,安全的,具有明顯的顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(如)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意保護(hù)。的條件下,應(yīng)使用不致癌,氫供體靈敏度高,如和為氫供體是令人滿意的。基板的影響,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿終止反應(yīng)。通常底物反應(yīng)時(shí)間,10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是22在使用前。
 

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