人抗胰島素受體抗體 (AIRA) ELISA試劑盒的準備
標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
80 U/ml | （6號標準品） | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
40 U/ml | （5號標準品） | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
20 U/ml | （4號標準品） | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
10 U/ml | （3號標準品） | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
5.0 U/ml | （2號標準品） | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
2.5 U/ml | （1號標準品） | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0 U/ml | （空白對照） | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
- 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
人抗胰島素受體抗體 (AIRA) ELISA試劑盒操作步驟
- 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
- 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
- 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
- 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
- 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
- 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
- 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
- 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
- 在450nm波長處測定各孔的OD值。
