ELISA試劑盒的組成：
    ELISA應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類，即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。自然抗原的純度不高，特異性不強(qiáng)；合成抗原一般為多肽片段，缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位，親和力不高，可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢；基因重組抗原具有安全、特異性強(qiáng)、親和力高、產(chǎn)量大等特點(diǎn)，是一種比較理想的抗原，但其純化比較困難。
    在ELISA試劑盒中酶作用于底物后生成有色物質(zhì)、熒光物質(zhì)或?qū)е禄瘜W(xué)發(fā)光，分別可用分光光度計(jì)、熒光光度計(jì)測(cè)量及照度計(jì)測(cè)量。熒光和化學(xué)發(fā)光測(cè)定的敏感度均高于比色測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍亦較比色反應(yīng)寬，測(cè)定效果優(yōu)于常用的比色ELISA。
    包被將免疫活性物質(zhì)（抗原或抗體）結(jié)合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等；常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-*間接包被法，特別是后一方法，效率高，酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒而且可用以包被不易吸附在固相上的各種免疫活性物質(zhì)。具體做法是先將鏈霉親和素包被在固相載體上，然后使與*化的抗原或抗體與之結(jié)合。由于親和素與*之間的高親和力，抗原或抗體即間接結(jié)合在親和素包被的固相上。
    臨床檢驗(yàn)的ELISA主要幾種類型：
    1 雙抗體夾心法測(cè)抗原：
    雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法，操作步驟如下：
    1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
    2）加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。 洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。 
    3）加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
    4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。
    2 雙抗原夾心法測(cè)抗體 ：
    反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測(cè)定，因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。
    3 間接法測(cè)抗體：
    間接法是檢測(cè)抗體常用的方法。其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗*抗體）以檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。
    操作步驟如下： 
    1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。 
    2）加稀釋的受檢血清，保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
    3）加酶標(biāo)抗抗體。可用酶標(biāo)抗人Ig以檢測(cè)總抗體，但一般多用酶標(biāo)抗人IgG檢測(cè)IgG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗體抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢抗體的量正相關(guān)。
    4）加底物顯色。本法主要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)而進(jìn)行傳染病的診斷。間接法的優(yōu)點(diǎn)是只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法。
    ELISA試劑盒種類：
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。