乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞 , BT474細(xì)胞5×10^5以上/1ml
對于大多數(shù)細(xì)胞研究工作者來說，乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞 , BT474細(xì)胞污染那可是個(gè)糟糕的事情，也是比較容易出現(xiàn)的情況，我們?nèi)绾畏婪叮绾伪苊?，是我們要學(xué)習(xí)和掌握的。
組織蛋白酶D（CTSD）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Cathepsin D （CTSD） Mus musculus （Mouse）
組織轉(zhuǎn)*酶（TGM2）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Transglutaminase 2, Tissue （TGM2） Mus musculus （Mouse）
乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞 , BT474細(xì)胞β-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1（β4GALT1）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Beta-1,4-Galactosyltransferase 1 （b4GALT1） Mus musculus （Mouse）
*原片段F1+2（F1+2）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 （F1+2） Rattus norvegicus （Rat）
*1（VB1）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Vitamin B1 （VB1） General
下面我們對細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染情況，做個(gè)總結(jié)：
1）原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。
2）霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長，但時(shí)間長之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或*或*或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，*或*或雙抗都于事無補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
3）細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，根據(jù)感染細(xì)菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃，對細(xì)胞生長影響明顯。仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠，壓力足夠！尤其是和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！ 可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理
4）黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率。
5）真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
6）支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。Sigma公司的使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細(xì)胞），37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長就是操作的問題。 也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（*和氨芐*）。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1、孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水2、超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素3、超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過大，風(fēng)機(jī)到6-8格。否則也可能能致霉菌污染4、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha （HIF1a） Homo sapiens （Human）
低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha （HIF1a） Mus musculus （Mouse）
低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha （HIF1a） Sus scrofa; Porcine （Pig）
低氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha （HIF1a） Rattus norvegicus （Rat）
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78（ENA78）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 （ENA78） Homo sapiens （Human）
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78（ENA78）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 （ENA78） Mus musculus （Mouse）
凋亡蛋白酶激活因子1（APAF1）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 （APAF1） Homo sapiens （Human）
趨化因子C-C-基元配體14（CCL14）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 14 （CCL14） Homo sapiens （Human）
白介素31（IL31）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 31 （IL31） Mus musculus （Mouse）
白介素19（IL19）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 19 （IL19） Homo sapiens （Human）
白介素19（IL19）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 19 （IL19） Mus musculus （Mouse）
白介素19（IL19）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 19 （IL19） Rattus norvegicus （Rat）
接觸蛋白1（CNTN1）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Contactin 1 （CNTN1） Homo sapiens （Human）
接觸蛋白1（CNTN1）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Contactin 1 （CNTN1） Mus musculus （Mouse）
多效生長因子（PTN）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Pleiotrophin （PTN） Homo sapiens （Human）
雙調(diào)蛋白（AREG）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Amphiregulin （AREG） Mus musculus （Mouse）
雙調(diào)蛋白（AREG）檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光免疫分析法） CLIA Kit for Amphiregulin （AREG） Rattus norvegicus （Rat）