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轉移胰腺腺癌細胞

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更新時間:2016-06-02 00:26:48瀏覽次數:144次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日轉移胰腺腺癌細胞保存到液氮中。
A00380 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 Human β-glucosidase ELISA Kit 96T/48T
A00381 人β內酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 Human β-lactamase ELISA Kit 96T/48T
A00382 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 Human α mannosidase,α Manase ELISA Kit 96T/48T
A00383 人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 Human Creatine Kinase,CK ELISA Kit 96T/48T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。
如何選用特殊細胞系培養基?
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始,各種目的無血清培養*AIM V(12005)培養基(SFM)。
L-*在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?
L-*在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鐘后,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A00363 人*(cAMP)ELISA試劑盒 Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 96T/48T
A00364 人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
A00365 人*(AP)ELISA試劑盒 Human Aprotinin,AP ELISA Kit 96T/48T
A00366 人基質金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒 Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit 96T/48T
A00367 人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 Human Phospholipase C,PLC ELISA Kit 96T/48T
A00368 人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 Human serine protease,PRSS ELISA Kit 96T/48T
A00369 人*(UK)ELISA試劑盒 Human urokinase,UK ELISA Kit 96T/48T
A00370 人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 Human Elastase ELISA Kit 96T/48T
A00371 人白細胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit 96T/48T
A00372 人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒 Human α-Amylase,AMS/AMY ELISA Kit 96T/48T
A00373 人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 Human alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 96T/48T
A00374 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 Human Collagenase Type II ELISA Kit 96T/48T
A00375 人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Human Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 96T/48T
A00376 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒 Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit 96T/48T
A00377 人透明質酸酶(HAase)ELISA試劑盒 Human Hyaluronidase,HAase ELISA Kit 96T/48T
A00378 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒 Human Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit 96T/48T
A00379 人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 Human β-glucuronidase,βGD ELISA Kit 96T/48T
 

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