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小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)

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更新時間:2016-07-11 23:53:24瀏覽次數:245次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)保存到液氮中。
A05251 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體(anti-HAV)ELISA Kit,48T/96T
A05252 羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA Kit,48T/96T
A05253 人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA Kit,48T/96T
A05254 小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA Kit,48T/96T
A05255 豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA Kit,48T/96T
A05256 大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA Kit,48T/96T
A05257 人抗內皮細胞抗體(AECA)ELISA Kit,48T/96T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鐘后,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A05233 人抗弓形體IgG抗體(anti-tox IgG)ELISA Kit,48T/96T
A05234 人旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA Kit,48T/96T
A05235 人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA Kit,48T/96T
A05236 人大腸菌素(colicin)ELISA Kit,48T/96T
A05237 人軍團菌抗原(LP Ag)ELISA Kit,48T/96T
A05238 人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA Kit,48T/96T
A05239 人血吸蟲(schistosoma)ELISA Kit,48T/96T
A05240 人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA Kit,48T/96T
A05241 人吖啶橙(AO)ELISA Kit,48T/96T
A05242 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA Kit,48T/96T
A05243 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA Kit,48T/96T
A05244 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA Kit,48T/96T
A05245 人抗核仁抗體(ANA)ELISA Kit,48T/96T
A05246 人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA Kit,48T/96T
A05247 人熱休克因子1(HSF-1)ELISA Kit,48T/96T
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A05249 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA Kit,48T/96T
A05250 人抗核因子抗體(ANF)ELISA Kit,48T/96T
 

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