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小鼠成纖維細胞

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更新時間:2016-05-11 14:50:47瀏覽次數(shù):168次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日小鼠成纖維細胞保存到液氮中。
A05418 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA Kit,48T/96T
A05419 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
A05420 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
A05421 魚骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA Kit,48T/96T
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【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A05397 人*(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
A05398 小鼠*(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
A05399 豬*(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
A05400 大鼠*(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
A05401 兔子*(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
A05402 人促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit,48T/96T
A05403 小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit,48T/96T
A05404 大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit,48T/96T
A05405 兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit,48T/96T
A05406 人抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA Kit,48T/96T
A05407 人抗精子抗體(AsAb)ELISA Kit,48T/96T
A05408 小鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA Kit,48T/96T
A05409 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA Kit,48T/96T
A05410 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA Kit,48T/96T
A05411 小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA Kit,48T/96T
A05412 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA Kit,48T/96T
A05413 人1,25二羥基*3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3
A05414 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA Kit,48T/96T
A05415 人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA Kit,48T/96T
A05416 小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA Kit,48T/96T
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