人脂聯素（ADP）免疫組化試劑盒。
該試劑盒以HRP 標記的鏈霉親和素復合物（HRP Streptavidin Conjugate，
HRP-SA）為基礎，可用于檢測細胞、組織內的特異性抗體 抗原。該試劑盒具有靈
敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的 一抗與相應靶抗原
結合后，用生物化二抗與一抗特異性結合，zui后加入HRP-SA，形成抗原—特異
一抗—*化二抗—HRP-SA 復合物，顯微鏡下觀察成像。
人脂聯素（ADP）免疫組化試劑盒，試劑盒所含試劑：
試劑A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（選用）
試劑B 封閉緩沖液（封閉用） 20 mL
試劑C （*分裝）已稀釋的即用型p38 一抗（2.5ml）
試劑D （*分裝）*化羊抗兔IgG 1 支
（濃度1.5 mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）100 μL+抗體稀釋液20ml
試劑E HRP-SA 復合物1 支（濃度1 μM，稀釋比1:50~1:200）100 μL
試劑F DAB 顯色液 5 ml
用戶自備試劑：
1． 10mM TBS（pH7.2~7.4）
三羥基氨基甲烷1.21g

加蒸餾水800mL，濃鹽酸調pH 值至7.2~7.4，zui后定容至1000mL
TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%體積比）
2．抗原修復液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復液）
10mM pH6.0 檸檬酸緩沖液
檸檬酸0.38g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水900mL，濃鹽酸調pH 值至6.0，zui后定容至1000mL
或：0.5M EDTA 修復液（pH8.0）
EDTA·2H2O 186.1g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水700mL，用10mM NaOH 調pH 值至8.0，zui后定容至1000Ml
3. 緩沖甘油封固劑10 mL
4. Tween 20 5 mL
石蠟包埋組織切片免疫染色
實驗步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片經下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min），85%
乙醇2 min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O 洗2×2min；
4.抗原修復： 根據抗體說明書*方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫
度達到98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗2×
2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附1）* 注：有些抗原勿需修復，
直接進入第5 步封閉。
5.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑B，37℃濕盒孵育10 min；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育
30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min；
12.加HRP-SA： 滴加用試劑C 稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20 nM），37
℃濕盒中孵育30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應用DAB 溶液（試劑F）顯色；
15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
注意事項：
1. 修復后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導致
結晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復使
用。
3. 若試劑為微量濃縮液，用前應低速離心，將內蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween 20，否則會
影響結果觀察。
5. 如須復染細胞核，則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封
片。
附1：
，抗原修復方法
常用抗原修復液：檸檬酸緩沖液（0.01M pH6.0）、EDTA 抗原修復液（pH8.0 或
9.0）等等。
一、酶消化修復法
切片脫蠟水化處理，TBS 沖洗，在組織上滴加*或*，37℃孵育
20~30min 后TBS 沖洗即可。
二、微波抗原修復法
微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料
切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或高檔繼續微波10~15min，取出微波
盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，
須自行調整。
三、直接高壓抗原修復法
取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復
液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min 即可脫離熱源，自
然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。
四、隔水式高壓抗原修復法
不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸
騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時
4~8 min 即可關閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用
于較難檢測或核抗原的修復。

KC01535B  Human adiponectin,ADP 免疫組化試劑盒
KC01536B 人*受體（VD R）免疫組化試劑盒 Human Vitamin D Receptor,VD R 免疫組化試劑盒
KC01537B 人毒性休克綜合征毒素1（TSST-1）免疫組化試劑盒 Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 免疫組化試劑盒
KC01538B 人金葡菌腸毒素（SE）免疫組化試劑盒 Human staphylococcus aureus enterotoxins,SE 免疫組化試劑盒
KC01539B 人鈣聯蛋白（calnexin）免疫組化試劑盒 Human calnexin 免疫組化試劑盒
KC01540B 人*龍（Prednisolone）免疫組化試劑盒 Human Prednisolone 免疫組化試劑盒
KC01541B 人繆勒管抑制物質/抗繆勒管激素（MIS/AMH）免疫組化試劑盒 Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH Elisa試劑盒
KC01542B 大鼠凋亡誘導因子（AIF）免疫組化試劑盒 Rat apoptosis inducing factor,AIF Elisa試劑盒
KC01543B 大鼠脂多糖結合蛋白（LBP）免疫組化試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP Elisa試劑盒
KC01544B 大鼠乙醇脫氫酶（ADH）免疫組化試劑盒 Rat alcohol dehydrogenase,ADH Elisa試劑盒
KC01545B 大鼠乙醛脫氫酶（ALDH）免疫組化試劑盒 Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH Elisa試劑盒
KC01546B 大鼠可溶性白細胞分化抗原14（sCD14）免疫組化試劑盒 Rat solution cluster of differentiation 14,sCD14 Elisa試劑盒
KC01547B 大鼠多巴胺D2受體（D2R）免疫組化試劑盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R Elisa試劑盒